[发明专利]一种均相免疫检测试剂盒、检测方法及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域的一种均相免疫检测试剂盒及其应用。该试剂盒包括试剂Ⅰ，其包含第一对应物；所述第一对应物为已知抗原或能够与待测样本中的待测抗原特异性结合的已知抗体；试剂Ⅱ，其包含能够与单线态氧反应生成可检测信号的受体以及与之结合的第二对应物，所述第二对应物能够与第一对应物特异性结合；试剂Ⅲ，其包含能够与第一对应物特异性结合的第三对应物；试剂Ⅳ，其包含能够在激发状态产生单线态氧的供体。所述第三对应物表面包被有生物素，而供体表面包被有链霉亲和素。利用所述的试剂盒联合检测抗原抗体的均相免疫检测方法，降低了原料筛选的难度，同时使检测的灵敏度得到提升。

本申请是申请日为2017年11月27日，申请号为201711203146.6，发明名称为“一种均相免疫检测试剂盒、检测方法及其应用”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种均相免疫试剂盒及其在联合检测同一病毒抗原、抗体中的应用。

背景技术

在某些运用化学发光方法检测的体外诊断项目中，需要对样本中的抗原和抗体同时进行检测。例如人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)的检测，已由之前仅对病毒抗体检测的三代试剂发展为当前较通用的抗原、抗体联合检测的四代艾滋检测试剂。这样就可以避免窗口期的患者因体内只有病毒抗原而没有相应的抗体或相应抗体滴度还不足以被检出时造成漏检的风险。因此，建立高效、可靠的抗原抗体联合检测的方法在诊断试剂开发领域乃至医疗卫生行业均有其重要的意义。

目前化学发光抗原抗体联检的方法，其通过标记抗原和标记抗体与待测样本中的抗体或抗原形成夹心复合物最终产生信号来进行检测。样本中有待测抗原或抗体中的任何一种结果都反应为信号上升。其弊端在于无法区分阳性信号值是由抗原引起还是由抗体引起，从而不能准确判断病程，无法给临床治疗提供可靠的信息。另外，该检测试剂中的标记原料需经严格筛选，标记的抗原和抗体不能有交叉反应，这就增加了试剂研发的难度并延长了研发周期。同时由于人为的避开某些位点，因此势必会牺牲一部分抗原和/或抗体检测的灵敏度。

发明内容

本发明针对现有技术的不足提供了一种均相免疫检测试剂盒，以及利用所述试剂盒联合检测同一病毒抗原、抗体的均相免疫方法。所述方法集竞争法和夹心法于一体，只需要标记抗原或抗体即可，不必同时标记抗原和抗体，避免了潜在的交叉反应，降低了原料筛选的难度，同时使检测的灵敏度得到提升。另外，本发明提供的方法在结果判读上更有临床意义，通过结果可以判断待测样本是抗原阳性或抗体阳性，为疫病诊断和治疗方案的制定提供依据。

为此，本发明第一方面提供了一种均相免疫检测试剂盒，其包括：

试剂Ⅰ，其包含第一对应物；所述第一对应物为已知抗原或能够与待测样本中的待测抗原特异性结合的已知抗体；试剂Ⅰ可用于稀释待测样本；

试剂Ⅱ，其包含能够与单线态氧反应生成可检测信号的受体以及与之结合的第二对应物，所述第二对应物能够与第一对应物特异性结合；

试剂Ⅲ，其包含能够与第一对应物特异性结合的第三对应物；

试剂Ⅳ，其包含能够在激发状态产生单线态氧的供体。

在本发明的一些实施方式中，所述第一对应物为能够与待测样本中的待测抗原特异性结合的已知抗体，且所述第二对应物和第三对应物均为已知抗原。

在本发明的一些具体实施方式中，所述已知抗体为单克隆抗体或抗体阳性血清。

在本发明的另一些实施方式中，所述第一对应物为已知抗原，且所述第二对应物和第三对应物均为能够与已知抗原特异性结合的第二抗体。

在本发明的一些具体实施方式中，所述第二抗体为单克隆抗体和/或多克隆抗体。

根据本发明，所述第三对应物表面包被有生物素，而供体表面包被有链霉亲和素。