[发明专利]一株停滞棒杆菌、筛选方法及其用途

说明书

本发明公开了一株停滞棒杆菌、筛选方法及其用途。保藏号为CGMCC No.19005。该菌株具有产生吲哚乙酸，促进植物生长的能力，也对四季小白菜种子发芽具有促生的能力。

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其涉及一株停滞棒杆菌、筛选方法及其用途。

背景技术

好氧堆肥过程中，处于不同堆肥阶段的微生物更替迭代迅速，群落结构会发生剧烈变化，富集和强化其中具有促生能力的功能微生物是提高有机肥料肥效的关键。吲哚乙酸(IAA)作为一类重要的植物激素，可以产生调节植物生长素的信号物质，对植物的新陈代谢、生长发育都起着重要作用。吲哚乙酸除了由植物自体产生外，还可以通过存在于土壤、植物表面和海洋环境中的特定微生物代谢产生。目前，向堆肥中接种外源微生物菌剂以提高发酵效率的研究已有研究，但尚无从堆肥中分离吲哚乙酸产生菌的相关报道。考虑到用从堆肥中分离的吲哚乙酸产生菌作为微生物菌剂，施用于堆肥中会有较好的定殖和适应能力，能安全稳定的在堆肥中进行应用。因此，在堆肥体内寻获能够有效产吲哚乙酸的微生物菌种资源具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一株产吲哚乙酸的停滞棒杆菌Corynebacteriumstationis 29B。

为实现上述目的，本发明提供一株停滞棒杆菌Corynebacterium stationis 29B，保藏号为CGMCC No.19005。

本发明还提供一种筛选所述停滞棒杆菌Corynebacterium stationis 29B的方法，其特征在于，

将从福建省厦门市城市环境研究所科研温室内收集的猪粪与玉米秸秆混合堆肥发酵后的物料置于盛有无菌水的锥形瓶中，置于摇床中震荡，静置后取其菌悬液进行梯度稀释，将10^-5-10^-7稀释度的菌液涂布至LB固体培养基上，放置于恒温箱中培养；挑取LB固体培养基上不同类型的单菌落，接种于LB液体培养基中，摇床中震荡培养；将培养后的菌液接种于含有L-色氨酸的LB液体培养基中，摇床中震荡培养后，取菌悬液滴于白色陶瓷板上，加入等量Salkowski试剂进行显色反应，室温下避光放置30min后观察，颜色变粉红色则表示菌株具产吲哚乙酸能力；

再取具产吲哚乙酸能力的菌株的菌悬液离心，取上清液加入等量Salkowski试剂，然后置于室温避光处，30min后用紫外可见分光光度计于波长530nm处测定其吸光度，根据吲哚乙酸标准关系曲线计算相应浓度，选取吲哚乙酸产量最高的即可。

本发明还提供一种所述停滞棒杆菌Corynebacterium stationis 29B的用途。

进一步，所述用途为具有产生吲哚乙酸的能力。

进一步，所述用途为能促进植物生长。

进一步，所述用途为能对四季小白菜种子的发芽具有促生效果。

进一步，所述用途为能增加堆肥产品的肥效；优选的，将含有停滞棒杆菌Corynebacterium stationis 29B的菌悬液加入到堆肥中正常管理堆肥即能增加堆肥产品的肥效；更优选的，堆肥质量和菌悬液的固液比为50：1的重量体积比，其中菌悬液的浓度为1.0×10⁸-10⁹cfu/mL。

本发明还提供一种生产吲哚乙酸的方法，其特征在于，接种停滞棒杆菌Corynebacterium stationis 29B于培养基中发酵培养后收集菌液即可。

进一步，所述接种的接种量为2-4％，初始pH为6-9，所述发酵培养为温度为20-35℃，转速为100-150r/min，培养时长为96-120h；

优选的，接种的接种量为2-3％，初始pH为6-8，所述发酵培养为温度为20-35℃，转速为100-150r/min，培养时长为108-120h；