[发明专利]于特定植物组织中沉默八氢蕃茄红素合成酶基因表现之DNA构筑体及其方法

权利要求书

1.一种调控文心兰花色之DNA卡匣构筑体，其包含：由几段核苷酸序列所组合而成，该DNA卡匣可于植物特定组织中，干扰八氢蕃茄红素合成酶基因之mRNA，以达花色调控之目的，该DNA卡匣包含一启动子与一段可产生发夹型干扰性RNA的DNA核苷酸序列。

2.如申请专利范围第1项所述之DNA卡匣，其中该启动子包含SEQ ID NO：1核苷酸序列，且该启动子能使特定基因于特定组织中专一性表达，仅达到改变花色之目的，但仍维持植株正常生长之生理机能。

3.如申请专利范围第1项所述之DNA卡匣，其中一段可产生发夹型干扰性RNA的DNA核苷酸序列，可经由如申请专利范围第2项所述之启动子之驱动下，于特定组织中转录产生发夹型干扰性RNA序列以干扰八氢蕃茄红素合成酶基因之mRNA，使之无法进一步转译成酶，并由下列核苷酸序列所组成：正向置放的PSY核苷酸序列、intronGUS核苷酸序列、方向倒置的PSY核苷酸序列、及NOS基因之终止片段(T-NOS核苷酸序列)，其中该PSY核苷酸序列包含SEQID NO：3核苷酸序列。

4.如申请专利范围第1项所述之DNA卡匣，其中该核苷酸序列提供于一载体或一穿梭载体或一拟原球体，其中该载体可经转殖导入至一植物细胞，或一拟原球体。

5.如申请专利范围3所述之SEQ ID NO：3核苷酸序列为SEQ ID NO：2核苷酸序列中自第51个核苷酸起之150个核苷酸长度之核苷酸序列。

6.一种调控文心兰花色之DNA卡匣构筑方法，其包含：提供至少一DNA卡匣，此DNA卡匣的核苷酸序列包含一特定启动子与一段可转录成发夹型干扰RNA片段的特定核苷酸片段，将该核苷酸序列导入(或转殖)至一植物细胞，以获得一转殖植物细胞，及利用该已转殖植物细胞再生发育成为植株，并达到改变植株花色之目的。

7.依申请专利范围第6项所述之一种调控文心兰花色之DNA卡匣构筑方法，其中该核苷酸序列经由基因选殖方式获得。

8.依申请专利范围第6项所述之一种调控文心兰花色之DNA卡匣构筑方法，其中该已转殖植物细胞用以改变一植物体内控制类胡萝卜色素之一种八氢蕃茄红素合成酶表现量。

9.依申请专利范围第6项所述之一种调控文心兰花色之DNA卡匣构筑方法，利用该已转殖兰科植物细胞再生制造一已转殖植物。

10.本发明较佳实施例提供一核苷酸序列，包含SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ IDNO：3及与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3之序列互补的核苷酸序列。