[发明专利]一种赪桐的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种赪桐的组培快繁方法，包括赪桐外植体消毒、不定芽诱导培养、增殖和生根培养、移栽；利用本发明方法，污染率仅6.1％，不定芽诱导率达91.8％，增殖系数7.5，生根率95％，且增殖和生根可同步完成，具有生长周期短、操作简单、繁殖系数高等特点，可直接用于赪桐苗木工厂化生产。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种赪桐的组培快繁方法。

背景技术

赪桐(Clerodendrumjaponicum(Thunb.)Sweet)是马鞭草科大青属植物，别名百日红、状元红、红花倒血莲等，通常生于平原、山谷、溪边或疏林中，分布于江苏、浙江南部、江西南部、湖南、福建、台湾、广东、广西、四川、贵州、云南等地。赪桐是优良的观花灌木，花色鲜艳，形态优美，花果期长达6个月，适合公园、花坛和花境的布置，逐渐在园林绿化上推广应用。此外，赪桐全株药用，首载于《南方草木状》，有祛风利湿、消肿散瘀的功效，是西南地区传统的民间药物。

由于赪桐具有一定的观赏和药用价值，在市场利益的驱动下，野生赪桐被过度采挖，使其自然生境遭受严重破坏。虽然赪桐已经可以人工种植，但仍以种子繁殖和扦插繁殖为主。由于坐果率不高，自然生长的种子发芽率低，导致赪桐种子繁殖效率低下；而扦插繁殖易造成早衰，繁殖速度慢。因此，利用组培快繁技术，实现赪桐优良植株的工厂化生产，对于提高赪桐繁殖率，促进赪桐产业化开发具有重要现实意义。

目前，在赪桐快繁体系研究中，仅有中国发明专利申请CN104255481A公开了一种赪桐悬浮细胞的快速繁殖方法，步骤包括无菌叶片获得、愈伤组织诱导和悬浮细胞培养，其技术方案并未涉及苗木组培扩繁。在赪桐近缘种的组培快繁体系研究中，均未研究增殖与生根同步发生技术，增加了培养基更换次数，不利于大规模工厂化生产。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中没有赪桐的组培方法的不足，提供一种同步进行增殖和生根培养的赪桐的组培快繁方法。

本发明的一种赪桐的组培快繁方法，包括以下步骤：

a.外植体消毒：取赪桐嫩芽，并去掉苞片，将嫩芽消毒处理；

b.不定芽诱导培养：将步骤a消毒的嫩芽外植体以形态学下端朝下接种至诱导培养基中，诱导不定芽发生，培养获得启动苗；所述的诱导培养基：每升含有6-BA 1-2mg、IBA0.2-0.5mg、蔗糖20g、琼脂7g，余量为MS培养基，pH5.8；

c.增殖和生根培养：将步骤b的启动苗切成单个茎段，接入增殖培养基中，同步进行增殖和生根培养，获得生根苗；所述的增殖培养基：每升含有6-BA 2mg、IBA0.2-0.5mg、蔗糖30g、琼脂7g，余量为MS培养基，pH5.8；

d.移栽：将步骤c的生根苗在自然光下炼苗然后移栽。

优选，所述的步骤a的嫩芽消毒处理，是将嫩芽置于质量分数0.4％洗衣粉水溶液中浸泡2min后取出，用自来水冲洗30min；然后用体积分数75％乙醇水溶液消毒30s，无菌水冲洗3次，再用添加有终浓度为质量分数0.02％吐温-20的质量分数0.1％的升汞溶液消毒6-8min，用无菌水冲洗5次。

优选，所述的步骤b、c的培养条件为：温度23℃，光照强度2000lx，光照时间16h/d。

优选，所述的步骤c的单个茎段为0.5-1cm高、带2个腋芽。

优选，所述的步骤d，是将步骤c的生根苗在自然光下炼苗3d后取出，洗净根部残留的培养基，栽植于泥炭基质中。

本发明的有益效果：本发明采用植物组织培养技术有效地建立了赪桐的组培快繁方法，且赪桐植株增殖与生根可同步完成，生长周期短、操作简单，且繁殖系数高，可直接用于赪桐苗木工厂化生产。

附图说明