[发明专利]一种精确定量中药中致癌物马兜铃酸的方法

说明书

本发明涉及一种精确定量中药中致癌物马兜铃酸的方法，该方法包括以下步骤：将马兜铃酸标准品添加到不含马兜铃酸的中药中，对其进行样品前处理‑液相色谱‑串联质谱法测定，得到标准曲线；将待分析中成药进行样品前处理，获得过滤液；利用液相色谱‑串联质谱法对所述过滤液进行测定，并将测定结果带入标准曲线求得待分析中药中马兜铃酸含量情况；其中，所述前处理的步骤中：提取剂为乙腈，除水剂为氯化钠和无水硫酸镁，固相萃取剂为PSA。本发明的方法不仅快速、准确，灵敏度较高，检出限和定量限均较低，重复性好，线性范围宽，具有良好的回收率和精密度，适合中成药中2种马兜铃酸的确证和定量测定。

技术领域

本发明属于分析化学和/或食品安全领域，涉及现代分析技术建立及应用，具体涉及一种精确定量中药中致癌物马兜铃酸的方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的一些理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

马兜铃酸是一系列结构类似的硝基菲羧酸，广泛存在于马兜铃属植物中，在一些中草药如马兜铃、关木通、广防己中含量较高。由于其强烈的致癌性与致畸性，马兜铃酸已被世界卫生组织列为I类致癌物。2017年10月，国际权威杂志Science TranslationalMedicine以封面文章形式发布的一项重要研究成果指出，马兜铃酸诱变可能是中国乃至亚洲地区肝癌高发的原因之一。这一研究报告再一次引起人们对马兜铃酸健康危害的高度重视。

由于马兜铃酸的强致癌性，很多西方国家已全面禁止含有马兜铃酸的中药出售。我国国家食品药品监督管理局也陆续取消了关木通、广防己和青木香的药用标准，对含马兜铃、寻骨风、天仙藤、朱砂莲的中药制剂严格按处方药管理。2015年，《中国药典》彻底取消了含有马兜铃酸的中草药。然而，含马兜铃酸的中药被删除出《中国药典》，只会让制药方在诉讼中陷入不利境地，却并不能禁止这些中药的生产、售卖。因此，含有马兜铃酸的中成药并未全面被禁。它们仍被用于治疗风湿、泌尿系统疾病等多种病症。因此，全面监控中成药中的马兜铃酸的使用迫在眉睫。

中草药中马兜铃酸的传统检测方法使用LC-MS、HPLC-MS/MS等仪器检测，如一些文献公开了一种测定中药水提液或甲醇水取液中马兜铃酸的方法，该方法可以对中草药水提取液中的马兜铃酸含量进行测定。但是本公开发明人发现，不同于特定目标中草药水中的马兜铃酸含量测定，中成药由于已制成食用药剂，或片剂或丸剂，其中添加大量其他成分，不利于马兜铃酸的检测。尤其是某些中成药中，在成分表中未标明含有马兜铃酸而极少量添加的样品，使用甲醇-水等传统的体系萃取，难以精确测定中成药中马兜铃酸的含量。此外，传统的马兜铃酸提取剂甲醇等虽然对马兜铃酸具有很好的溶解性和提取效果，但是由于中成药中马兜铃酸含量不仅极低，且含有其他同样可以溶解在甲醇中的糖、食用色素等干扰成分。而且，还存在着回收率低、通用性差等技术问题。

可见，急需建立一种高效、快捷、安全的前处理及液质联用方法来有效应对中成药中马兜铃酸检测工作的需要。

发明内容

本发明的目的正是基于现有技术中的研究现状而提出的一种测定中药中马兜铃酸类药物的方法，以解决目前在处理中成药样品中，马兜铃酸的萃取效率低检测限高等的缺陷，同时该方法相比其他公开方法，具有前处理用时短，萃取溶剂用量少等优点，不仅灵敏度高、准确性好、回收率高，显著提高了检测效率，还使检测人员减少与有毒试剂的接触。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种精确定量中药中马兜铃酸的方法，该方法包括以下步骤：

将马兜铃酸标准品添加到不含马兜铃酸的中药中，对其进行样品前处理-液相色谱-串联质谱法测定，得到标准曲线；

将待分析中成药进行样品前处理，获得过滤液；