[发明专利]亚洲玉米螟的控制

说明书

本发明提供了用于控制亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)并且保护作物(特别是玉米)免受由亚洲玉米螟引起的经济损害的方法。本发明进一步涉及用编码本发明的Cry蛋白(单独地或与其他杀昆虫蛋白相组合地)的核酸分子稳定地转化的植物用于控制或对抗亚洲玉米螟的用途。

发明领域

本发明涉及用于通过使用杀有害生物蛋白和编码它们的核酸分 子，特别是通过使用苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis(“Bt”)) Cry蛋白和编码所述Cry蛋白的cry基因，来控制或对抗秆野螟属 (Ostrinia)，特别是亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)(鳞翅目 (Lepidoptera)，草螟科(Crambidae))(也称为亚洲玉米钻蛀虫 (Asian cornborer))的方法。

发明背景

苏云金芽孢杆菌(Bt)是一种革兰氏阳性的形成芽孢的土壤细菌， 其特征在于其产生特异性地对于某些目和种的植物有害生物(包括昆 虫)有毒性但对于植物和其他非靶标生物无害的晶状内含体的能力。 因此，包含苏云金芽孢杆菌菌株或其杀昆虫蛋白的组合物可以用作环 境可接受的杀昆虫剂以控制农业昆虫有害生物或者各种各样的人或动 物疾病的昆虫媒介。

来自苏云金芽孢杆菌的晶体(Cry)蛋白主要针对鳞翅类、双翅 类和鞘翅类有害生物昆虫具有强效的杀昆虫活性。这些蛋白质还显示 出针对在膜翅目(Hymenoptera)、同翅目(Homoptera)、虱目 (Phthiraptera)、食毛目(Mallophaga)和蜱螨亚纲(Acari)有害 生物目以及其他无脊椎动物目例如线形动物门(Nemathelminthes)、 扁形动物门(Platyhelminthes)和肉鞭虫门(Sarcomastigorphora) 中的有害生物的活性(Feitelson,J.1993.The Bacillus Thuringiensis family tree.Advanced EngineeredPesticides.Marcel Dekker,Inc., New York,N.Y.)。这些蛋白质最初被分类为CryI至CryVI，主要基 于它们的杀昆虫活性。主要类别为鳞翅目特异性的(I)、鳞翅目和双 翅目特异性的(II)、鞘翅目特异性的(III)、双翅目特异性的(IV) 和线虫特异性的(V)和(VI)。所述蛋白质被进一步分类成亚家族； 在每个家族内更高度相关的蛋白质被分配了分组字母，例如CryIA、 CryIB、CryIC等。在每个分组内更加紧密相关的蛋白质被给予了诸 如CryIC(a)、CryIC(b)等的名称。术语“Cry毒素”和“δ-内毒素” 已经与术语“Cry蛋白”可互换使用。关于Cry蛋白和基因的当前命 名基于氨基酸序列同源性，而非昆虫靶标特异性(Crickmore等人, (1998)Microbiol.Mol.Biol.Rev.62:807-813)。在这个更被接受的分 类法中，每种毒素被分配了独一无二的名称，其合并了第一等级(阿 拉伯数字)、第二等级(大写字母)、第三等级(小写字母)和第四 等级(另一阿拉伯数字)。在当前的分类法中，罗马数字已被调换为 第一等级中的阿拉伯数字。例如，在旧命名法下的“CryIA(a)”现在 是在当前命名法下的“Cry1Aa”。根据Ibrahim等人(2010,Bioeng. Bugs,1:31-50)，Cry毒素仍然可以根据其昆虫宿主特异性分为六个 主要类别，并且包括：第1组——鳞翅类(例如，Cry1、Cry9和Cry15)； 第2组——鳞翅类和双翅类(例如，Cry2)；第3组——鞘翅类(Cry3、 Cry7和Cry8)；第4组——双翅类(Cry4、Cry10、Cry11、Cry16、 Cry17、Cry19和Cry20)；第5组——鳞翅类和鞘翅类(Cry1I)； 和第6组——线虫(Cry6)。所述Cry1I、Cry2、Cry3、Cry10和 Cry11毒素(73-82kDa)是独特的，因为它们看起来是更大的Cry1 和Cry4蛋白(130-140kDa)的天然截短。