[发明专利]用于免疫调节蛋白表达的多基因构建体和其使用方法

权利要求书

1.一种表达载体，其包括SEQ ID NO:13的核酸序列。

2.根据权利要求1所述的表达载体，其中表达载体由SEQ ID NO:13的核酸序列组成。

3.一种表达载体，其包括对由SEQ ID NO:9的氨基酸序列组成的氨基酸序列进行编码的核酸序列。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其中所述核酸序列包括SEQ ID NO:8的核苷酸序列。

5.根据权利要求3到4中任一项所述的表达载体，其中所述核酸序列与启动子操作性地连接。

6.根据权利要求5所述的表达载体，其中所述启动子选自由以下组成的组：CMV启动子、Igκ启动子、mPGK启动子、SV40启动子、β-肌动蛋白启动子、α-肌动蛋白启动子、SRα启动子、疱疹胸苷激酶启动子、单纯疱疹病毒(HSV)启动子、小鼠乳腺肿瘤病毒长末端重复序列(LTR)启动子、腺病毒主要晚期启动子(Ad MLP)、劳斯肉瘤病毒(RSV)启动子和EF1α启动子。

7.根据权利要求6所述的表达载体，其中所述启动子是CMV启动子。

8.根据权利要求7所述的表达载体，其中所述表达载体包括SEQ ID NO:14的核苷酸序列。

9.一种药物组合物，其包括治疗有效剂量的根据权利要求1到8中任一项所述的表达载体。

10.一种治疗受试者的肿瘤的方法，所述方法包括将根据权利要求9所述的药物组合物注射到所述肿瘤中并且向所述肿瘤施用至少一个电穿孔脉冲。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述电穿孔脉冲的场强为约200V/cm到约1500V/cm。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述电穿孔脉冲的脉冲长度为约100微秒到约50毫秒。

13.根据权利要求12所述的方法，其中并且施用至少一个电穿孔脉冲包括施用1-10个脉冲。

14.根据权利要求13所述的方法，其中施用至少一个电穿孔脉冲包括施用6-8个脉冲。

15.根据权利要求11所述的方法，其中所述电穿孔脉冲的场强为200V/cm到500V/cm，并且脉冲长度为100微秒到50毫秒。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述电穿孔脉冲的场强为约350-450V/cm，并且脉冲长度为约10毫秒。

17.根据权利要求10所述的方法，其中向所述肿瘤施用至少一个电穿孔脉冲包括施用场强为约400V/cm并且脉冲长度为约10毫秒的8个电穿孔脉冲。

18.根据权利要求10到17中任一项所述的方法，其中所述电穿孔脉冲由能够产生电化学阻抗谱的发生器递送。

19.根据权利要求10到18中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。

20.根据权利要求10到19中任一项所述的方法，其中所述肿瘤选自以下的组：黑色素瘤、乳腺癌、三阴性乳腺癌、梅克尔细胞癌、皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)和头颈部鳞状细胞癌。

21.根据权利要求9所述的药物组合物，其用于治疗受试者的癌症。

22.一种根据权利要求9所述的药物组合物的用途，其用于制造用于治疗癌症的药剂。

23.根据权利要求9所述的药物组合物，其中所述药物组合物被调配成用于注射到所述肿瘤中并且通过施用至少一个电穿孔脉冲递送到所述肿瘤。