[发明专利]包含混合电荷肽的融合产物和生物缀合物

说明书

公开了带电荷的多肽、其缀合物和包含这样的多肽的融合蛋白。在融合蛋白中包含这样的多肽增强蛋白的特性，如稳定性和循环半衰期，其与单独的活性蛋白相比，产生更好的治疗效果。因此，本发明的融合蛋白或缀合物可以用于开发蛋白或肽药物，治疗或预防疾病、障碍或病症，或改善受试者的健康或幸福感。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年10月10日提交的第62/743,663号美国专利申请的权益，其全部内容明确地通过引用并入本文。

关于序列表的声明

与本申请相关联的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并且在此以引用方式并入说明书中。包含序列表的文本文件的名称为70421_Sequence_final_2019-10-10。文本文件为60.1KB；创建于2019年10月10日；并在提交说明书时通过EFS-Web一起提交。

政府许可权利的声明

本发明是在由美国国防威胁降低局(Defense Threat Reduction Agency，DTRA)授予的资助号为HDTRA1-13-1-0044P00011的政府支持下完成的。政府对本发明享有某些权利。

背景

已知肽和蛋白对许多疾病和综合征具有巨大的治疗潜力。药物生物技术领域中的进步使市场上基于蛋白和肽的治疗剂的价值和数量增加。目前，已经批准了超过100种蛋白作为治疗剂，还有更多的蛋白正在经历临床试验。尽管生物制药市场目前和未来都在增长，但是仍然存在与实现有前景的治疗性蛋白相关的重大挑战。这些挑战中的许多挑战极大地降低了治疗剂的功效，并且这些限制通常是通过治疗剂及其制备所固有的特性赋予的。这些固有特性可以导致构象变化、降解、聚集、沉淀和吸附到表面上。另外，这些治疗性蛋白的特征通常在于短的半衰期和免疫原性应答，特别是考虑到许多这些重组蛋白来源于非人类生物体或在非人类宿主中表达。所产生的不良药代动力学已经是生物药物开发面临的关键问题。

当前，最被接受的方法之一是使用聚乙二醇(PEG)修饰治疗性蛋白，聚乙二醇(PEG)是一种无毒且推定为非免疫原性的聚合物。该过程通常称为PEG化，已知其改变生物分子的物理和化学特性，包括构象、静电结合和疏水性，并且可以使药物的药代动力学特性改善。PEG化的优点包括改善药物溶解度和降低免疫原性，增加给药后的药物稳定性和循环时间，以及减少蛋白水解和肾脏排泄，所有这些均能降低给药频率，使得患者依从性增加和治疗效果更好。PEG化技术已应用于多种治疗性蛋白，以提供已获得美国FDA批准的新药。然而，由于诱导的和预先存在的抗PEG抗体，对使用PEG化的生物药物的担心仍然存在。PEG化蛋白已显示在抗PEG抗体的存在下从一些健康个体引发免疫应答的能力。注射抗原性物质可以潜在地引起细胞因子级联反应或其他潜在的严重免疫应答，因此应避免其作为药物制剂的组分。之前证明了使用两性离子聚合物(例如聚(羧基甜菜碱)(pCB))作为两亲性PEG的替代物赋予超亲水、超低生物结垢和蛋白稳定的特性。pCB与蛋白的化学缀合增加蛋白的稳定性，而不影响其活性。然而，由于pCB的合成来源，因此pCB可能遭遇与PEG相同的缺点。最后，已证明将由重复的赖氨酸(K)和谷氨酸(E)残基组成的结构域掺入融合多肽中可以改善产生的多肽的某些特性；然而，很难控制这种多肽的大小和形状。

存在对具有更好的药代动力学和其他有利特性的药物，例如蛋白的需求，所述有利特性包括改善的溶解度、降低的给药频率、延长的循环寿命、提高的稳定性以及增强的对蛋白水解降解的保护。

附图说明

当结合附图时，本发明的前述方面和许多附带的优点将变得更加容易理解，因为通过参考下面的详细描述，本发明的前述方面和许多附带的优点将变得更好理解。