[发明专利]嫁接介导的单子叶植物杂交

权利要求书

1.一种产生杂种单子叶植物组织或植株的方法，其包括：

(a)提供第一组织，其包含第一单子叶植物植株的：

(i)中胚轴和胚根组织；或

(ii)中胚轴和胚芽组织，

其中所述第一组织在其基因组中包含第一标记物；

(c)提供第二组织，其包含第二种不同的单子叶植物植株的：

(i)中胚轴和胚根组织；或

(ii)中胚轴和胚芽组织，

其中所述第二组织在其基因组中包含第二种不同的标记物；

(c)使所述第一组织与所述第二组织接触；

(d)允许所述第一组织和第二组织融合，从而形成嫁接接合处，其中所述嫁接接合处包含至少一个含有所述第一标记物和第二标记物的杂种细胞；

(e)基于所述第一标记物和第二标记物的存在选择所述至少一个杂种细胞；和

(f)从所述至少一个杂种细胞中再生杂种单子叶植物组织或植株。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一组织包括中胚轴和胚芽组织，所述第二组织包括中胚轴和胚根组织。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中在步骤(d)之后和步骤(e)之前，切割所述嫁接接合处以提供至少一个纵向嫁接接合处切片，其中所述嫁接接合处切片包含所述至少一个含有所述第一标记物和第二标记物的杂种细胞。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述第一标记物和/或所述第二标记物是可选择标记物，其中所述可选择标记物可用选择剂选择。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述第一标记物和/或所述第二标记物是视觉标记物；优选地，其中所述视觉标记物是：

(i)荧光标记物；

(ii)GUS；或

(iii)荧光素酶。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述第一标记物和/或所述第二标记物是内源性状，其中所述内源性状对于所述第一组织和所述第二组织都不是内源的；优选地，其中所述内源性状赋予：

(i)耐盐性；

(ii)耐冷性；

(iii)耐冻性；

(iv)重金属解毒；

(v)爆发性解毒；或

(vi)代谢甘露糖、木糖或苄基腺嘌呤-N-3-葡糖苷酸的能力。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述第一标记物和所述第二标记物是可选择标记物，其中所述第一可选择标记物可用第一选择剂选择，并且所述第二可选择标记物可用第二种不同的选择剂选择。

8.根据权利要求4或7所述的方法，其中所述第一选择剂和/或所述第二选择剂包括：

(i)抗生素；

(ii)除草剂；

(iii)毒素；

(iv)盐；或

(v)糖。

9.根据权利要求8所述的方法，其中：

(i)所述抗生素选自：卡那霉素、遗传霉素(G418)、潮霉素、巴龙霉素、新霉素、大观霉素、链霉素、庆大霉素、妥布霉素、安普霉素、博莱霉素、草霉素、链丝菌素和/或氯霉素；

(ii)所述除草剂选自：草甘膦、草铵膦(或草铵膦/BASTA)、双丙氨膦、氯磺隆、3-(3,4-二氯苯基)-1,1-二甲基脲(DCMU)、阿特拉津、百草枯、甲基紫精、甲磺隆-甲基、绿草定、3-氨基-1,2,4-三唑(3-AT)、磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑并嘧啶类、嘧啶基氧代苯甲酸酯类和/或磺酰氨基羰基三唑啉酮类；

(iii)所述毒素选自：2-脱氧葡萄糖、硫代赖氨酸、甲氨蝶呤、氨腈、次氯酸钠、加巴丘林、4-甲基色氨酸和/或甘氨酸甜菜碱醛；和/或

(iv)所述糖选自：甘露糖、木糖和苄基腺嘌呤-N-3-葡糖苷酸。