[发明专利]胰岛素产生细胞的制造方法

说明书

本发明以提供不进行人为的基因导入而从体细胞制造胰岛素产生细胞的方法、通过该制造方法得到的胰岛素产生细胞或包含可用于该制造方法的化学物质的组合的组合物为主要课题。作为本发明，例如可举出：通过从体细胞直接分化诱导而制造胰岛素产生细胞的方法，其特征在于包含在RSK抑制剂的存在下培养体细胞的工序；通过该制造方法得到的胰岛素产生细胞；用于通过从体细胞直接分化诱导而制造胰岛素产生细胞的组合物，其特征在于包含RSK抑制剂。通过本发明得到的胰岛素产生细胞在再生医疗等中是有用的。

技术领域

(关连申请的相互参照)

此申请是主张于2018年11月14日向日本专利厅申请的日本申请编号第2018-213448号的优先权的申请。该日本申请，其全部申请文件(说明书、权利要求的范围、附图、摘要)以明示的形式，作为本说明书全部的目的参照而引用于本说明书。

本发明属于再生医疗，或从体细胞的直接重编程(Direct Reprogramming)的技术领域。本发明涉及：在该技术领域中，通过低分子化合物从体细胞直接制造胰岛素产生细胞的方法，以及涉及的制造方法所制造的低分子化合物诱导性胰岛素产生细胞(ciIPCs：chemical compound-induced Insulin-producing cells)。本发明进一步涉及该胰岛素产生细胞，以及可用于制造该胰岛素产生细胞的方法的组合物。

背景技术

将ALK5抑制剂、ALK6抑制剂等的几种低分子化合物组合，在其存在下培养体细胞，特别是人类成纤维细胞，其后不进行基因导入，而直接分化诱导为褐色脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经系统细胞或心肌细胞的方法已有报道(例如，专利文献1)。如专利文献1的发明，如果能将常见的成纤维细胞，通过容易获得的低分子化合物直接诱导为褐色脂肪细胞等的细胞，这是非常有益的。例如，由于能从自身的成纤维细胞简便地制作自身的其他细胞，因此其在再生医疗方面的应用能够扩大。另外，也能够容易地制作作为用于新医药品开发的实验材料的细胞。

间叶系的细胞形成肌肉、骨、软骨、骨髓、脂肪以及结缔组织等的生物体的各种器官，有望作为再生医疗的材料。间叶系干细胞(mesenchymal stem cell：MSC)是存在于骨髓、脂肪组织、血液、胎盘以及脐带等的组织的未分化细胞。由于具有向属于间叶系的细胞分化的分化能力，因此间叶系干细胞作为制造这些细胞时的出发材料而受到关注。另外，将间叶系干细胞自身用于骨、软骨、心肌等的再构建的再生医疗也正在被探讨。

实际上，也有从间叶系干细胞分化为神经细胞或胰岛素产生细胞的报告例(非专利文献1，2)。在非专利文献1中，通过SB431542和多尔吗啡之类的低分子抑制剂的组合，使间叶系干细胞分化为神经细胞。

对于分泌胰岛素的胰脏β细胞，除了有从iPS细胞或ES细胞分化诱导为人类胰腺β细胞的报道，也有从胰腺α细胞、胰腺腺泡细胞、胰腺导管腺细胞、小肠隐窝细胞、肝细胞、胆管细胞之类的内胚叶类细胞，使用胰腺β细胞特异性转录因子Pdx1、Ngn3以及MafA，直接诱导为胰腺β细胞的报道(非专利文献3)。另外，还有从小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)或人类皮肤成纤维细胞，使用山中4因子等，直接诱导为胰腺β细胞的报道(非专利文献4、5)。甚至还有从小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)，通过低分子化合物，制作内胚叶祖细胞，再从该细胞分化为胰脏内分泌细胞的报告(非专利文献6)。

关于作为RSK抑制剂的低分子化合物BRD7389，则有其具有使胰腺α细胞中胰岛素基因的表达活化的能力的报道(非专利文献7)。

现有技术文献

专利文献

[专利文献1]国际公开第2018/062269号册

非专利文献

[非专利文献1]Stem Cells International，Volume 2016，Article ID 1035374