[发明专利]针对LCP-1阳性癌症的基于微小RNA的治疗

说明书

本发明涉及miRNA组，其包含miR‑16‑5p、miR‑23a‑5p、miR‑125b‑5p、miR‑145‑5p、miR‑146a‑3p、miR‑181c‑5p、miR‑218‑5p、miR‑495‑3p、let‑7b‑5p，并进一步包含选自miR‑30a‑5p、miR‑30b‑5p、miR‑30c‑5p、miR‑30d‑5p、miR‑30e‑5p、miR‑194‑5p、miR‑302a‑3p、miR‑302a‑5p、miR‑335‑3p、miR‑335‑5p、miR‑367‑3p、miR‑373‑3p和miR‑885‑5p的一种或多种miRNA，并涉及装载所述miRNA组的例如干细胞来源的细胞外囊泡(EV)。本发明进一步提供了用于治疗患者中LCP‑1阳性癌症的方法的该组或EV。

技术领域

本发明涉及使用miRNA的新技术及其在LCP-1阳性癌症中靶向和下调癌蛋白活性的能力。本技术设计用于递送封装在生物或合成囊泡中的特定miRNA抑制剂序列，其将影响与癌症的发生、生长、侵袭性和转移相关的一组基因和蛋白质(包括LCP1/LCP-1)的表达。

背景技术

癌症是一种具有细胞层次结构和许多不同的表型的异质性疾病，具有很高的肿瘤扩散和转移能力。发展至转移期对有效的癌症治疗提出了最严峻的挑战，并造成大多数与癌症相关的死亡。侵袭-转移级联是一个多步骤的细胞过程，涉及癌细胞通过周围细胞外基质的扩散，在循环中的存活和最初的接种，然后是在转移部位的微环境中随后的扩增(定殖)。这些步骤需要癌细胞具有高运动性，这通过调节细胞的细胞骨架来促进。最近的研究指出，细胞骨架结合蛋白是肿瘤转移的重要参与者，特别是由于它们结合和调节整联蛋白分子的能力。因此，这些分子是抑制肿瘤细胞转移特性的有希望的靶标。具体而言，某些癌症会表达肌动蛋白重组蛋白LCP-1(L-丝束蛋白(Plastin)，丝束蛋白-2，淋巴细胞胞浆蛋白(lymphocyte cytosolic protein)1)，其通常是白细胞特异性的，且在非造血细胞中不存在¹。该蛋白质最近被鉴定为用于早期检测各种形式的癌症(例如肾癌、结肠癌和乳腺癌)的生物标志物²。LCP-1是一种70kDa的，受Ca²⁺调节且与肌动蛋白结合的蛋白，其在适应性和先天性免疫系统中都起着重要作用³。肌动蛋白结合蛋白的丝束蛋白家族由三种显示组织特异性表达的同工型(isoform)组成。它们表现出相似的分子排列，在C端包含两个连续的肌动蛋白结合结构域，每个结构域都由两个钙调理蛋白同源(CH)结构域组成。这种结构允许LCP-1可以将肌动蛋白丝(actin filament)组织成非常紧密的束⁴。LCP-1功能对于先天性以及适应性免疫系统的细胞都很重要。研究表明，LCP-1对于免疫突触的形成至关重要⁵，并且它调节粒细胞⁶和T细胞⁷的整联蛋白依赖性粘附和迁移。也有人认为它可能在肿瘤细胞运动中起作用。已知LCP-1的肌动蛋白束活性是钙依赖性的，因为增加钙浓度会抑制肌动蛋白束的形成。还显示，Ser5磷酸化可在体外增强LCP-1的肌动蛋白集束(actin bundling)活性，从而促进其靶向肌动蛋白组装位点。通过LCP-1磷酸化的调控已被描述为是由于免疫应答以及对触发迁移的信号的响应。