[发明专利]表达外源葡糖淀粉酶和木聚糖酶的酿酒酵母菌株及其在生产生物乙醇中的用途

权利要求书

1.酿酒酵母菌株，其特征在于，其共表达：

-编码真菌来源的木聚糖酶的基因；

-编码真菌来源的葡糖淀粉酶的基因；和

-编码来自酿酒酵母糖化变种的葡糖淀粉酶的基因。

2.如权利要求1所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述真菌来源的木聚糖酶是黑曲霉木聚糖酶或里氏木霉木聚糖酶。

3.如权利要求2所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述真菌来源的木聚糖酶是由核酸序列SEQ ID NO:5编码的或由多肽序列SEQ ID NO:6或多肽序列SEQ ID NO:6的功能性变体组成的黑曲霉木聚糖酶。

4.如权利要求2所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述真菌来源的木聚糖酶是由核酸序列SEQ ID NO:7编码的或由多肽序列SEQ ID NO:8或多肽序列SEQ ID NO:8的功能性变体组成里氏木霉木聚糖酶。

5.如权利要求1-4任一项所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述来自酿酒酵母糖化变种的葡糖淀粉酶由核酸序列SEQ ID NO:3编码或由多肽序列SEQ ID NO:4或多肽序列SEQID NO:4的功能性变体组成。

6.如权利要求1-5任一项所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述真菌来源的葡糖淀粉酶选自下组：黑曲霉葡糖淀粉酶、扣囊复膜酵母菌葡糖淀粉酶、里氏木霉葡糖淀粉酶、嗜热单胞菌葡糖淀粉酶、米根霉葡糖淀粉酶和米曲霉葡糖淀粉酶。

7.如权利要求6所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述真菌来源的葡糖淀粉酶是由核酸序列SEQ ID NO:1编码的或由多肽序列SEQ ID NO:2或多肽序列SEQ ID NO:2的功能性变体组成的黑曲霉葡糖淀粉酶。

8.如权利要求1-7任一项所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，其包含：

-m个拷贝的所述编码真菌来源的木聚糖酶的基因；

-n个拷贝的所述编码真菌来源的葡糖淀粉酶的基因；和

-p个拷贝的所述编码来自酿酒酵母糖化变种的葡糖淀粉酶的基因，

其中，m是1-10的整数，n是2-10的整数，且p是2-10的整数。

9.如权利要求8所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，m是1或4。

10.如权利要求8或9所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，n是6且p是4。

11.如权利要求1-10任一项所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，所述编码真菌来源的木聚糖酶的基因、所述编码真菌来源的葡糖淀粉酶的基因以及所述编码来自酿酒酵母糖化变种的葡糖淀粉酶的基因被整合至所述酵母菌株的基因组中。

12.如权利要求1所述的酿酒酵母菌株，其特征在于，其是于2017年4月26日以保藏号I-5201保藏于CNCM的菌株。

13.获得可用于生产生物乙醇的酿酒酵母菌株的方法，所述方法包括如下步骤：

(a)基因改造酿酒酵母，使其共表达编码真菌来源的木聚糖酶的基因，编码真菌来源的葡糖淀粉酶的基因，和编码来自酿酒酵母糖化变种的葡糖淀粉酶的基因，或

获得如权利要求1-11任一项所述的酿酒酵母菌株；

(b)在合成糊精培养基上培养并发酵所述步骤(a)中获得的酵母；和

(c)选择至少一种菌株，其在发酵动力学上至少等于或大于于2015年7月9日以保藏号I-4997保藏于CNCM的菌株。