[发明专利]颗粒、颗粒的制造方法、亲和颗粒、包括其的试剂和试剂盒、和检测目标物质的方法

说明书

颗粒包括共聚物，所述共聚物包括在侧链中具有硫基或仲胺、以及三个或更多个羟基的重复单元A，和在侧链中具有至少一个反应性官能团用于结合配体的重复单元B，其中抑制非特异性吸附。

技术领域

本发明涉及颗粒、颗粒的制造方法、亲和颗粒、包括其的测试试剂和测试试剂盒、和检测目标物质的方法。

背景技术

在近些年，通过使用由彼此化学结合的颗粒和具有与目标物质相容性的配体形成的亲和颗粒广泛研究了目标物质的纯化和量化。期望用于这个目的的颗粒具有对除目标物质之外的物质的吸附(所谓的非特异性吸附性质)低的性质。例如，非专利文献1公开了通过使用苯乙烯和甲基丙烯酸缩水甘油酯两种单体的乳液聚合获得并具有被聚甲基丙烯酸缩水甘油酯覆盖的表面的树脂颗粒(下文中为SG颗粒)。专利文献1(日本专利公开号2014-193972)公开了控制SG颗粒的粒径的方法。

在SG颗粒中，来源于聚甲基丙烯酸缩水甘油酯的一些环氧基开环形成二醇，并且该二醇的亲水性降低了非特异性吸附。同时，在将配体化学结合至SG颗粒表面的情况下，还能够在没有进一步处理的情况下使用来源于聚甲基丙烯酸缩水甘油酯的环氧基。然而，经常使用包括将环氧基转化为其他反应性官能团例如羧基、氨基或硫醇基并随后使反应性官能团与配体化学反应的工序的方法。特别地，通过将SG颗粒的环氧基转化为羧基获得的颗粒是优选形式，因为这样的颗粒在将配体化学结合到颗粒表面方面具有高通用性。

在近些年，胶乳凝集免疫测定作为简单且快速的免疫测定引起了注意。这种方法包括将颗粒的分散液与可能含有目标物质(抗原或抗体)的试样混合，所述颗粒包括作为配体的与其化学结合的抗体或抗原。此时，如果试样中含有目标物质(抗体或抗原)，则发生颗粒的凝集反应。因此，可通过光学检测该凝集反应，作为例如在散射光强度、透射光强度或吸光度方面的改变量，从而确定是否存在疾病。在胶乳凝集免疫测定中使用的颗粒如在SG颗粒中优选具有低的非特异性吸附能力和用于固定配体的反应性官能团以便减小误导的噪声。

引用列表

专利文献

PTL1：日本专利公开号2014-193972

PTL2：日本专利公开号2014-153140

非专利文献

NPL1：Bioseparation using affinity latex(1995)第11-30页

发明内容

本发明的发明人按照非专利文献1(Bioseparation using affinity latex(1995)第11-30页)合成了SG颗粒并进一步使来源于在SG颗粒中包括的甲基丙烯酸缩水甘油酯的环氧基与氨基酸化学反应以获得其中环氧基转化成羧基的颗粒。然而，如以上所述获得的颗粒与SG颗粒相比具有退化的抑制非特异性吸附的能力。同时，已知在SG颗粒上引入羧基的方法。在这个方法中，通过用氨水处理SG颗粒，随后使经处理颗粒与乙二醇二缩水甘油醚化学反应，并进一步使来源于乙二醇二缩水甘油醚的环氧基与氨基酸化学反应从而获得这样的颗粒。以这种方式获得的颗粒抑制非特异性吸附。然而，因为颗粒表现出过度的分散稳定性，所以颗粒难以凝集并且当颗粒用在胶乳凝集免疫测定中时可能无法获得足够灵敏度。此外，还存在化学反应过程在多个阶段中进行并且复杂、不适合工业化的问题。

考虑到背景技术和上述问题做出了本发明。具体地，本发明的目的是提供颗粒，所述颗粒具有抑制非特异性吸附的高能力并具有反应性官能团以用于将配体与颗粒表面化学结合。另一个目的是提供以高产量简单地制造该颗粒的新方法。

根据本发明的颗粒特征在于包括共聚物，所述共聚物包括在侧链中具有硫醚基或仲胺、以及三个或更多个羟基的重复单元A，和在侧链中具有至少一个反应性官能团以用于结合配体的重复单元B，其中通过表面上存在的羟基抑制非特异性吸附。

根据本发明的颗粒制造方法特征在于包括：