[发明专利]长链肽的制造方法

说明书

本发明的目的在于提供适合工业上大量合成的高效的长链肽的制造方法。本发明的长链肽的制造方法的特征在于，用磺酸将N末端被Boc基保护的原料肽片段的N末端进行脱保护，而且对C末端被ONBn基保护的原料肽片段的C末端选择性地进行脱保护，通过液相法将得到的N末端脱保护肽片段和C末端脱保护肽片段进行缩合。

技术领域

本发明涉及长链肽的高效的制造方法。

背景技术

长链肽结构是近年来备受关注的肽医药品的主要结构。由于是有望在未来有所发展的领域，因此，虽然其高效的制造方法是市场希望的，但并不存在真正高效的方法。例如，作为代表性的肽制造方法，有固相合成法。在固相合成法中，使用担载于固相的氨基酸作为起始原料，通过将氨基酸一个一个地延伸的方法来合成长链肽。

[化学式1]

根据固相合成法，也可以合成包含100个以上氨基酸的长链肽。但是，为了在固相上进行全部反应，各反应的结束需要大量过量的试剂等，未必是高效的方法，至少不适合工业上的大量生产。

与此相对，根据在液相中进行全部反应的液相合成法，反应性高，与固相法相比，试剂量也可以大幅减少。但是，在基于液相合成法进行片段偶联时，需要制备将C末端保护基团和N末端保护基团分别选择性去除的片段，各片段的保护基团通常难以选择。例如，羟基、羧基的保护经常使用能够用氢化这样的稳和且简便的方法来去除的苄基，但是如果用苄基保护C末端和侧链羟基、侧链羧基，则无法通过氢化选择性地仅将C末端脱保护。

作为肽片段的C末端保护基团，在非专利文献1、2所记载的方法中，用4-硝基苄基酯基保护C末端，在90％乙酸中、于锌粉末的存在下进行了脱保护。但是，该锌粉末的量不是催化剂量，例如，相对于应将C末端脱保护的肽片段273mg，锌粉末的用量为100mg。因此，在工业上大量生产目标的肽的情况下，需要大量的锌粉末，而且也需要在反应后处理大量的乙酸，因此，该方法对环境的负担大，不适于工业上的大量生产。

另外，在非专利文献1、2所记载的方法中，用TFA(三氟乙酸)对被Boc(叔丁氧羰基)保护的N末端进行了脱保护。但是，该TFA在下一N末端脱保护肽片段与C末端脱保护肽片段的缩合反应中发生副反应，因此，在蒸发之后，通过利用正己烷的清洗和使用KOH颗粒的真空干燥，被完全去除。可以认为，在制造长链肽时，每次去除Boc基进行这样操作的方法并不是高效的。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：TAKASHI ABIKO等、Chem.Pharm.Bull.,28(12),pp.3542-3548(1980)

非专利文献2：TAKASHI ABIKO等、Chem.Pharm.Bull.,29(5),pp.1390-1397(1981)

发明内容

发明要解决的课题

如上所述，与固相合成法相比，可以认为长链肽的液相合成法适合工业上的大量合成，通常难以选择保护基团，而且有时需要在每次N末端脱保护时完全去除脱保护用试剂。

因此，本发明的目的在于提供适合工业上大量合成的长链肽的高效的制造方法。

解决课题的方法

本发明人等为了解决上述课题而进行了深入研究。其结果是发现，在长链肽的液相合成法中，如果用磺酸类将被Boc保护的肽片段的N末端脱保护、且预先用ONBn保护肽片段的C末端，则至少从N末端的脱保护起可以在同一体系内(一锅反应)进行与C末端脱保护肽片段的缩合反应，而且容易选择反应性侧链官能团的保护基团，从而完成了本发明。

将本发明示于以下。

[1]一种用于制造长链肽的方法，该方法包括：