[发明专利]新颖的抗-肌钙蛋白T抗体

说明书

本发明涉及改进的变体单克隆抗体，其结合心肌肌钙蛋白T并且具有比由保藏于欧洲动物细胞培养物保藏中心（European Collection of Animal Cell Cultures,GB）的杂交瘤克隆7.1 A 12.2‑22(ECACC 89060901)产生的单克隆抗体12.1A11.11‑7更好的K_D。

本发明涉及特异性结合心肌肌钙蛋白T (SEQ ID NO：1)的新颖的单克隆抗体，所述抗体的特征在于CDR包含以下氨基酸序列或其相差至多一个氨基酸置换的变体：(i)在轻链可变结构域中的CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列、所述CDR2包含SEQ ID NO：3的氨基酸序列、所述CDR3包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列，以及(ii)在重链可变结构域中的CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1包含SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：6；或SEQ IDNO：7的氨基酸序列、所述CDR2包含SEQ ID NO：8、或SEQ ID NO：9的氨基酸序列、所述CDR3包含SEQ ID NO：10；SEQ ID NO：11；SEQ ID NO：12；或SEQ ID NO：13的氨基酸序列，其中至少两个CDR选自SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：7的CDR1、SEQ ID NO：9的CDR2、和SEQ ID NO：12的CDR3，或其中CDR1是SEQ ID NO：7、CDR2是SEQ ID NO：8、和CDR3是SEQ ID NO：11或SEQ IDNO：13，条件是如果存在SEQ ID NO：6的CDR1，则a) CDR3既不是SEQ ID NO：11也不是SEQ IDNO：13，或b)该抗体内的CDR2和CDR3不同时分别是SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：12。

在本说明书中，引用了许多文件，包括专利申请和生产商的手册。这些文件的公开内容尽管不被认为与本发明的专利性有关，但是一并通过引用整体并入。更具体地，所有参考文件通过引用并入，达到如同明确地且单独地指出每篇单独文件通过引用并入相同的程度。

心肌肌钙蛋白是心脏损伤的敏感和特异性生物标志物。特别地，心肌肌钙蛋白T(cTnT)是高度心脏特异性的，并且在非心肌肌肉或其它组织损伤后不存在于血清中。此外，已经表明cTnT是比用于诊断心肌梗死的其它生物标记更持久和灵敏的生物标记。因此，心肌肌钙蛋白通常可用于诊断急性心肌缺血，并且cTnT是特别有用的。

心肌肌钙蛋白T是在心脏病患者中广泛使用的生物标志物。Westermann等人最近已经综述了它在心脏病患者中的效用。(Nature Reviews / Cardiology, vol 14 (2017)473-483。在怀疑患有急性心肌梗塞(AMI)的患者中，cTnT的使用已得到很好的确立，但是肌钙蛋白测量也用于其它急性和非急性场合。对于具有疑似AMI的患者，早期决策对于快速治疗和进一步诊断评价是至关重要的。

肌钙蛋白的更新高灵敏度测定法能够检测明显更低的浓度。使用这些测定法和非常低的截止浓度，已经报道了几种快速诊断策略会改善急性心脏护理中的诊断。此外，肌钙蛋白测定的非冠脉和非急性应用（例如作为具有心力衰竭、肺栓塞或稳定冠状动脉疾病的患者中的生物标志物）即将出现，并可能改善个体风险分级。

通常在夹心型免疫测定法中测量心肌肌钙蛋白T，其中至少一种抗体用于捕获cTnT，且至少第二种（经标记的）抗体用于检测样品中的cTnT。德国Roche Diagnostics公司出售的cTnT的第五代测定也是如此。由欧洲动物细胞培养物保藏中心（GB）保藏的杂交瘤克隆7.1 A 12.2-22 (ECACC 89060901)所产生的单克隆抗体12.1A11.11-7自从将近三十年来一直在cTnT的测定中被用作最佳检测抗体。自从该抗体于1989年产生以来，没有出现用于检测cTnT的更好的单克隆抗体。

在过去的几年中，已经开发了用于测量各种肌钙蛋白的更灵敏的测定法，例如基于标记在此类测定中使用的检测抗体的先进技术。

许多研究已经评价了肌钙蛋白的各种高灵敏度测定，这是由于它们改善对疑似AMI患者的分诊的潜力以及它们在临床诊断的其它领域中的实用性。