[发明专利]双特异性抗体CAR细胞免疫疗法

权利要求书

1.一种载体，包含：

编码嵌合抗原受体（CAR）的多核苷酸，该CAR包含：（a）癌症或肿瘤靶向抗体的抗原结合结构域；（b）铰链结构域；（c）跨膜结构域；以及（d）细胞内结构域；以及

编码双特异性抗体的多核苷酸，该双特异性抗体包含识别并结合NKG2D的抗原结合结构域。

2.根据权利要求1所述的载体，其中所述CAR包含：（a）癌症或肿瘤靶向抗体的抗原结合结构域；（b）CD8 α铰链结构域；（c）CD8 α跨膜结构域；（d）CD28共刺激信号传导区域和/或4-1BB共刺激信号传导区域；以及（e）CD3 ζ信号传导结构域。

3.根据权利要求1或2所述的载体，其中所述癌症或肿瘤靶向抗体靶向B细胞成熟抗原（BCMA）和/或SLAMF7（也称为CS1或CD319）、和/或其每个的等效物。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的载体，其中所述双特异性抗体包含NKG2D的配体或抗NKG2D scFv和抗SLAMF7抗体（也称为CS1或CD319）的抗原结合结构域、和/或其每个的等效物。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的载体，其中所述双特异性抗体包含针对NKG2D的抗体的CDR区域和抗SLAMF7抗体（也称为CS1或CD319）的抗原结合结构域、和/或其每个的等效物。

6.根据权利要求5所述的载体，其中所述双特异性抗体包含针对NKG2D的抗体的重链和轻链可变区域以及抗SLAMF7抗体（也称为CS1或CD319）的抗原结合结构域、和/或其每个的等效物。

7.根据权利要求5或6的载体，其中所述双特异性抗体包含衍生自针对NKG2D的抗体的单链可变片段（scFV），以及任选的衍生自抗SLAMF7抗体（也称为CS1或CD319）的单链可变片段（scFv），和/或其每个的等效物。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的载体，其中所述载体是质粒，并且任选地包含用于调节所述多核苷酸的表达的启动子。

9.根据权利要求1至7中任一项所述的载体，其中所述载体是选自逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体和腺相关病毒载体的病毒载体，并且任选地包含用于调节所述多核苷酸的表达的启动子。

10.一种分离的细胞，其包含权利要求1至9中任一项所述的载体。

11.根据权利要求10所述的分离的细胞，其中所述细胞是原核细胞或真核细胞。

12.根据权利要求11所述的分离的细胞，其中所述细胞是真核细胞。

13.根据权利要求12所述的分离的细胞，其中所述真核细胞选自动物细胞、哺乳动物细胞、牛细胞、猫细胞、犬细胞、鼠细胞、马细胞或人细胞。

14.根据权利要求12或13所述的分离的细胞，其中所述真核细胞是免疫细胞，任选地是T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞、髓样细胞、单核细胞或巨噬细胞。

15.根据权利要求10至14中任一项所述的分离的细胞，其中所述分离的细胞表达所述CAR并分泌所述双特异性抗体。

16.一种组合物，其包含权利要求1至9中任一项所述的载体和/或权利要求10至15中任一项所述的分离的细胞，以及任选的药学上可接受的载体。

17.一种分离的复合物，其包含与表达癌症或肿瘤抗原的细胞结合的权利要求10至15中任一项所述的分离的细胞，任选地，其中所述癌症或肿瘤抗原是NKG2D和/或SLAMF7（也称为CS1或CD319）、和/或其每个的等效物。