[实用新型]一种检测输注CAR-T细胞后血液中细胞因子的试剂盒

说明书

本实用新型公开了一种检测输注CAR‑T细胞后血液中细胞因子的试剂盒，其包括试剂盒本体，所述试剂盒本体内设置有：第一储存区域，所述第一储存区域内设置有冰袋和第一试剂容器，所述第一试剂容器中储存有抗体偶联的荧光微球、生物素标记的检测抗体、PE荧光素偶联的链霉亲和素、多蛋白混合标准品；和第二储存区域，所述第二储存区域内设置有冰袋、第二试剂容器和第三试剂容器，所述第二试剂容器中储存仪器校正微球，包括无标记微球、PE标记微球、FITC标记微球，第三试剂容器中储存有缓冲液、洗液和基础液B。以及第三储存区域，所述第三储存区域内设置有第四容器，第四容器中储存有96孔可真空抽吸板、封板膜以及数据分析软件的许可插件。

技术领域

本实用新型涉及检测领域，特别涉及一种检测血液中细胞因子的试剂盒。

背景技术

嵌合抗原受体淋巴细胞是近年来新兴的一种特异性细胞免疫治疗技术，这一技术主要是使用慢病毒等载体将嵌合抗原受体基因转导到T淋巴细胞内，使其在T淋巴细胞表面表达，从而介导T淋巴细胞对肿瘤细胞的特异性识别和杀伤。

注射CAR-T细胞后，CAR-T细胞识别肿瘤上的靶抗原导致T细胞活化而分泌大量细胞因子。这些细胞因子包括IL1β、IL2、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、GM-CSF、 IL1RA、IL4、IL-8、IL15、MIP-1β等。这些细胞因子水平的增高会导致发热、低血压，缺氧呼吸困难，并可能与肝、肾、心脏功能障碍和凝血功能异常有关。这些症状统称为细胞因子释放综合征。CRS判定标准为：a.连续三天发烧；b.两个细胞因子最大值均高出标准75倍或者一个细胞因子最大值高出标准250倍。c.至少发生一种毒性相关的临床症状。所以检测外周血中特定细胞因子水平是监测及验证CRS出现的主要方法，在防治CAR-T治疗不良反应中起着重要作用。

本试剂盒采用抗体包被的荧光(APC)微球来捕获血清(血浆)中的细胞因子，通过双抗夹心ELISA方法的原理，将荧光分子PE标记到微球上，PE荧光强度和血清(血浆) 中的细胞因子含量正相关。荧光微球分为两种大小，5um和7um，小微球有6种不同的APC 荧光强度，大微球有7种不同的荧光强度，使用流式细胞仪可把这13种不同大小不同荧光强度的微球区分开来，然后用标准品制作标准曲线，对应样品中PE的荧光强度来对样品中的细胞因子浓度进行定量。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本实用新型的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

本实用新型提供了一种检测输注CAR-T细胞后人外周血中特定细胞因子(8或13种) 的试剂盒，其内部结构使置于其中的特定试剂均能保持最佳性能且便于运输。

本实用新型具体提供了以下技术方案：

一种检测血液中特定细胞因子的试剂盒，包括试剂盒本体，所述试剂盒本体内设置有：第一储存区域，所述第一储存区域内设置有冰袋和第一试剂容器，并且所述冰袋包围在第一试剂容器外，所述第一试剂容器中储存有抗体偶联的荧光微球(8种或13种微球预混)、生物素标记的检测抗体、PE荧光素偶联的链霉亲和素(SA-PE)、多蛋白混合标准品；和第二储存区域，所述第二储存区域内设置有冰袋、第二试剂容器和第三试剂容器，并且所述冰袋包围在第二试剂容器和第三试剂容器外，所述第二试剂容器中储存仪器校正微球，包括无标记微球，PE标记微球，FITC标记微球，第三试剂容器中储存有缓冲液、洗液和基础液B。

上述试剂盒在另一种实施方式中，还设置有第三储存区域，所述第三储存区域设置有第四容器，所述第四容器无冰袋包围，第四容器中储存有96孔可真空抽吸板(或V型底96 孔板)、封板膜和数据分析软件的许可插件。

上述试剂盒在另一种实施方式中，所述第一试剂容器、第二试剂容器和第三试剂容器中的一种或多种为棕色塑料瓶。