[发明专利]寨卡病毒囊膜蛋白的鼠源单克隆抗体

说明书

本发明公开了一种寨卡病毒囊膜蛋白的鼠源单克隆抗体，通过筛选和基因改造后，所获抗体的特异性好、中和活性强、抗聚集性增，适用于寨卡病毒的防治。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地指一种寨卡病毒囊膜蛋白的鼠源单克隆抗体。

背景技术

寨卡病毒(ZIKV)是一种黄病毒科病毒，感染该病毒后可导致新生儿的小头畸形并影响婴幼儿的神经发育，成年人感染后可能发生格林巴利综合征(GBS)导致神经损伤。目前尚无获批的疫苗和特效药物，这里我们利用自己构建的寨卡病毒囊膜蛋白免疫小鼠，获得了具备较强中和活性的鼠源单克隆抗体，将来可以运用于寨卡病毒的防治。

发明内容

本发明的目的在于填补现有技术的空白，提供一种特异性好的寨卡病毒囊膜蛋白的鼠源单克隆抗体。

为实现上述目的，本发明提供了一种针对寨卡病毒囊膜蛋白的鼠源单克隆抗体，其轻链序列如SEQ No.1所示，其重链序列如SEQ No.3所示。

上述针对寨卡病毒囊膜蛋白的鼠源单克隆抗体对应的碱基序列，其轻链序列如SEQ No.4所示，其重链序列如SEQ No.5所示。

本申请的发明人在中国专利申请201811613477.1的研究基础上，利用其构建噬菌体文库的方法进行筛选并进一步基因改造，获得了效果较好的鼠源单克隆抗体。

本发明的有益效果：通过筛选和基因改造后，所获抗体的特异性好、中和活性强、抗聚集性增强，适用于寨卡病毒的防治。

附图说明

图1-1为Tango软件预测B0氨基酸序列的易聚集区。

图1-2为Tango软件预测突变后B8氨基酸序列的易聚集区。

图1-3为B0和B8的重链突变区域比较图。

图2为SDS-PAGE检测B8抗体。

图3为ELISA分析B8抗体与寨卡病毒囊膜蛋白的结合图。

图4为B8抗体对寨卡病毒的中和活性图。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细描述。以下实施例是在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

实施例1：B8抗体序列的获得

基于已构建的免疫小鼠Fab噬菌体展示文库，(该文库的获得方法来自中国专利申请201811613477.1公开的黄病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白及其制备方法与应用，利用其中的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠后获得其cDNA，利用其作为噬菌体展示文库的构建材料)，我们进行了三轮的筛选，并通过单克隆phage ELISA，将其中的阳性克隆送测序，得到了B0候选克隆的碱基序列，并经氨基酸翻译软件(https://web.expasy.org/translate/)，得到了其氨基酸序列，轻链氨基酸序列如SEQ No.1所示，其重链氨基酸序列如SEQ No.2所示。。

实施例2：利用Tango软件对获得的B0氨基酸序列进行优化

利用Tango软件(http://tango.crg.es/)对B0候选克隆的氨基酸序列进行易聚集区预测，发现其中存在较强的易聚集区域，如图1-1，因此对该区域进行点突变，得到B8抗体，其轻链氨基酸序列如SEQ No.1所示，其重链氨基酸序列如SEQ No.3所示，对应碱基序列，轻链如SEQ No.4所示，重链如SEQ No.5所示。突变后的氨基酸序列经Tango软件重新预测，发现该易聚集区被明显改善，如图1-2，1-3。

实施例3：293F细胞表达B8抗体并SDS-PAGE检测