[发明专利]一种诱导纤细裸藻高效合成脂肪酸的方法

说明书

本发明涉及一种诱导纤细裸藻高效合成脂肪酸的方法，步骤如下：将纤细裸藻在琼脂质量浓度为0.8％的固体HUT异养培养基中划线，置于黑暗环境中筛选，选择在黑暗条件下能在固体培养基中长出藻落的的裸藻细胞，挑取并接入HUT异养培养基中进行培养，光照为0，温度控制在25±1℃，培养96h后，将其转入光照条件下光诱导48h，连续光照48h，光照为30μmol(m²/s)，光暗比12L:12D，每天摇瓶数次，防止微藻细胞附壁或下沉。本方法选取异养培养与光诱导结合的培养方式，该培养方式可提高纤细裸藻总脂肪酸以及单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和饱和脂肪酸(SFA)含量。

技术领域

本发明属于藻类技术领域，尤其是一种诱导纤细裸藻高效合成脂肪酸的方法。

背景技术

纤细裸藻(Euglena gracilis)属于裸藻门、裸藻属，主要分布在阳光充足、有机质丰富、静止无流水的小水体中，在营养充足、天然原生态的环境中得以繁殖。其营养方式为兼性营养，既可以通过光合作用制造营养，有效固定环境中的CO₂，又可以通过渗透营养来摄取有机物，如牛肉膏、蛋白胨、醋酸盐、乙醇等，不同的营养方式对微藻代谢产物的种类与含量有较大的影响。纤细裸藻含有丰富的营养成分，包括氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、裸藻糖和抗氧化成分(如β胡萝卜素、维生素C、维生素E等)，富含59种人体必需的营养元素，氨基酸种类尤其丰富，含有人类所需的全部氨基酸。目前，纤细裸藻在生物饵料应用方面的重要性逐渐被认识，已被增补到《饲料原料目录》中。但是，对纤细裸藻代谢产物与环境互作机制这一问题的研究尚未见报道。

纤细裸藻的自养培养藻细胞生长速度慢，且脂肪酸含量低，且脂肪酸、饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸组分少。

通过检索，发现如下一篇与本发明专利申请相关的专利公开文献：

一种提高裸藻生物量及脂肪酸含量的方法(CN106520657A)，包括步骤：1)取对数生长期的藻液，离心取上清；2)用传统培养基重悬藻细胞，离心，去上清，然后用传统培养基重悬藻细胞；3)用去离子水重悬纳米铁颗粒，加入到培养液中；4)25～30℃光照培养。本发明针对裸藻培养中生长和油脂积累的矛盾，采用合理添加痕量的纳米铁材料，发明了一种配方简易、成本低廉的新型培养方法，从而达到保证低廉成本、生长速度以及提高油脂积累的理想裸藻大规模培养的目的。

通过对比，本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种诱导纤细裸藻高效合成脂肪酸的方法，该方法选取异养培养与光诱导结合的培养方式，该培养方式可提高纤细裸藻总脂肪酸以及单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和饱和脂肪酸(SFA)含量。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种诱导纤细裸藻高效合成脂肪酸的方法，步骤如下：

将纤细裸藻在琼脂质量浓度为0.8％的固体HUT异养培养基中划线，置于黑暗环境中筛选，选择在黑暗条件下能在固体培养基中长出藻落的的裸藻细胞，挑取并接入HUT异养培养基中进行培养，光照为0，温度控制在25±1℃，培养96h后，将其转入光照条件下光诱导48h，连续光照48h，光照为30μmol(m²/s)，光暗比12L:12D，每天摇瓶数次，防止微藻细胞附壁或下沉。

而且，所述HUT异养培养基的配方如下：

本发明取得的优点和积极效果为：

1、本发明方法选取异养培养与光诱导结合的培养方式，该培养方式可提高纤细裸藻总脂肪酸以及单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和饱和脂肪酸(SFA)含量。利用黑暗胁迫条件筛选纤细裸藻，在不影响藻细胞生长的条件下提高藻细胞脂肪酸组分含量。