[发明专利]一种检测抗胰岛素自身抗体的试纸条及其制备方法

说明书

本发明涉及免疫检测领域，公开了一种检测抗胰岛素自身抗体的试纸条，包括PVC底板、及依次搭接在PVC底板上的样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述结合释放垫包被含胶体金标记的抗人IgG，所述硝酸纤维素膜上设有由羊抗鼠IgG抗体包被的质控线和胰岛素抗原包被的检测线。本发明还提供了所述试纸条的制备方法。本发明所述试纸条特异性强，不与其他自身抗体发生交叉反应；灵敏度检测结果显示性质稳定，重现性好。方法简单，操作方便，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种免疫检测领域，特别是涉及一种检测抗胰岛素自身抗体的试纸条及其制备方法。

背景技术

糖尿病是由遗传和环境因素相互作用而引起的常见病，临床以高血糖为主要标志，常见症状有多饮、多尿、多食以及消瘦等，分为1型和2型糖尿病两种类型。

1型糖尿病有一定的家族聚集性。有研究报告双亲有糖尿病史，其子女1型糖尿病发病率为4％～11％；兄弟姐妹间1型糖尿病的家族聚集的发病率为6％～11％；同卵双生子1型糖尿病发生的一致性不到50％。

人类白细胞抗原(HLA)基因位于第6对染色体短臂上，为一组密切连锁的基因群，HLA由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3类基因编码。Ⅰ类基因区域包括HLA-A、HLA-B、HLA-C和其他一些功能未明的基因及假基因，其编码的抗原分子存在于全部有核细胞的表面，负责递呈外来抗原给CD8的T淋巴细胞；Ⅱ类基因区域主要包括HLA-DR、HLA-DQ和HLA-DP3个亚区，分别编码DR、DQ和DP抗原，存在于成熟B淋巴细胞及抗原递呈细胞表面，负责递呈抗原给CD4细胞；Ⅲ类基因区域编码包括某些补体成分在内的一些可溶性蛋白，如C2C4A、C4B、肿瘤坏死因子(TNF)和热休克蛋白(HSP)等。HLA通过主要组织相溶性复合体(MHC)限制，参与T淋巴细胞识别抗原和其他免疫细胞的相互作用，以及自身耐受的形成和维持，在识别自身和异己、诱导和调节免疫反应等多个方面均具有重要作用。可见，HLA在许多自身免疫性疾病包括1型糖尿病的发生有相关性。

1型糖尿病发生常与某些感染有关或感染后随之发生。常见的感染原有腮腺炎病毒、风疹病毒、巨细胞病毒、麻疹病毒、流感病毒、脑炎病毒、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒及Epstein-Barr病毒等。

已明确1型糖尿病由免疫介导的胰岛β细胞破坏所致，现已证实在1型糖尿病的发生发展过程中，可检测到多种针对胰岛β细胞的自身抗体(IAA)。在已确诊的1型糖尿病患者中，胰岛素自身抗体IAA的阳性率约为50％。胰岛素自身抗体对糖尿病的诊断、鉴别诊断及治疗具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种检测抗胰岛素自身抗体的试纸条，包括PVC底板、及依次搭接在PVC底板上的样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述结合释放垫包被含胶体金标记的抗人IgG，所述硝酸纤维素膜上设有由所述抗人IgG的第二抗体包被的质控线和胰岛素抗原包被的检测线。

作为优选，所述抗人IgG为鼠源。更优选的，所述抗人IgG的二抗为羊抗鼠二抗。

本发明应用抗原抗体反应及免疫层析一步法原理，即血清中抗胰岛素自身抗体(Human insulin autoantibodies，简称IAA)与检测试剂中胶体金标记的抗人IgG结合，再与硝酸纤维素膜上固定的胰岛素抗原结合，从而沉积下来形成检测色带，根据试纸中段检测线(Test-line简称T线)及其上方表示试纸有效的质控线(Control-line，简称C线)处有无色带显示，作为胰岛素依赖型糖尿病(1型糖尿病)辅助诊断的快速检测试纸。

本发明还提供了包含所述试纸条的检测抗胰岛素自身抗体的试剂盒。

本发明还提供所述试纸条的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备胶体金溶液；