[发明专利]一种刷状聚合物修饰的氧化石墨烯-固定化捕获受体复合物及其在单克隆抗体富集中的应用

说明书

一种刷状聚合物修饰的氧化石墨烯‑固定化捕获受体复合物及其在单克隆抗体富集中的应用。刷状聚合物修饰的氧化石墨烯复合物的制备方法包括如下步骤：1)在氧化石墨烯表面修饰引发剂；2)在CuCl、CuCl₂和N,N,N',N”,N”‑五甲基二亚乙基三胺存在的条件下，步骤1)的产物与丙烯酸经表面引发原子转移自由基聚合即得。本发明将固定化捕获受体的特异性富集和LC‑MS的高灵敏检测结合，有望得到单抗药物在体内精确的药代动力学参数及代谢转化过程。可通过更换捕获受体而达到对不同抗体药物或者蛋白药物的高效富集检测，从而可以将该高效特异的富集检测方法推广到其它蛋白药物的分析检测及药代动力学研究中，并进一步指导药物研发、机理研究及临床用药等。

技术领域

本发明涉及一种刷状聚合物修饰的氧化石墨烯-固定化捕获受体复合物及其在单克隆抗体富集中的应用。

背景技术

治疗性单克隆抗体是以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程技术制备的药物。自1986年第一个单抗药物Muromonab-CD3经美国FDA批准上市以来，抗体类药物的研究与开发已成为生物制药领域研究的热点，并占据了越来越多的市场份额。由于该类药物具有靶向性强、毒副作用小及治疗效果好等优点，在恶性肿瘤、感染、免疫疾病及器官移植排斥等疾病的治疗中应用广泛。与传统的小分子药物相比，抗体药物的化学本质为糖蛋白，这也使得其具有独特的药代动力学特征。同时，对抗体药物的分析检测更易受到内源性蛋白质的干扰，因此，开发抗体药物的快速、灵敏及特异的分析检测方法以满足其药代动力学研究并进一步指导新药研发显得尤为重要。

现有的针对抗体药物的药代动力学研究中常用的分析检测方法主要为免疫分析法，包含酶联免疫吸附检测法(ELISA)、放射免疫法及免疫荧光分析法等。这些方法都是基于抗体与其特异性抗原相互作用实现的，在药物的绝对定量分析中存在一定的局限性。首先，内源性IgG、抗体降解产物及抗抗体等的存在对方法的定量准确性、灵敏度及特异性构成干扰，直接影响了药物的药代动力学参数。其次，由于该方法不能引入内标矫正系统及偶然误差，进一步影响了定量的准确度；最后，由于这些方法不能获得所检测目标物的结构信息，因此不能对药物及其代谢产物进行区分，更不能准确获得药物在体内的生物转化信息并进一步确定治疗活性成份，给临床药代动力学研究带来一定的挑战，也延缓了药物的研究进程。