[发明专利]一种诱导卫星胶质细胞转分化为神经元的方法

说明书

本发明公开了一种诱导卫星胶质细胞转分化为神经元的方法，所述方法操作如下：取传代培养后的卫星胶质细胞在含有Anti‑proBDNF的诱导培养液中诱导培养3～7天后得到神经元。本发明在生理条件下(未进行外源性基因转染)，抑制内源性proBDNF能够诱导卫星胶质细胞向神经元表型的分化。本发明为周围神经系统的发生提供了一种新的理论支持，发现周围神经发生的一种新的方式‑‑由神经胶质细胞直接转分化为神经元。为外周神经发育及损伤修复治疗研究提供了新的理论依据，而且本发明方法操作更简便，转分化率较高。

技术领域

本发明涉及细胞转分化领域，尤其涉及一种诱导卫星胶质细胞转分化为神经元的方法。

背景技术

神经系统(nervous system，NS)包括中枢神经系统(central nervous system，CNS) 和周围神经系统(peripheral nervous system，PNS)，是机体内对生理功能活动的调节起主导作用的系统是机体最重要的系统。神经系统结构、功能复杂，依旧存在很多未解之谜。因此，神经系统的发育、损伤以及修复一直是医学研究领域的热点之一。

在中枢神经系统中，神经细胞的损伤、凋亡后的修复主要是通过神经干细胞(Neural stem cells，NSCs)的诱导分化为神经细胞，从而替代损伤部位的神经细胞。成年哺乳动物中枢神经系统存在神经发生的现象，其结果和重要性已是一个公认的医学研究观点，神经发生现象在大脑可塑性、学习记忆等认知功能和损伤修复中起着关键性的作用。那么，在外周神经系统是否也存在同中枢神经系统类似的神经发生现象？研究发现外周神经系统也存在神经发生或神经元数量增多现象，但却较少被认识到。

背根神经节(dorsal root ganglion，DRG)位于两节椎骨之间的椎孔内，属于周围神经系统，是外周传入神经和传出神经的中转站，为初级感觉神经元的聚集处，是躯体感觉的初级传入神经元。外周神经疾病或者损伤可导致背根节神经元减少、神经元之间的连接出现紊乱、创伤性神经瘤的形成等，造成感觉传导异常，引起神经病理性疼痛。神经病理性疼痛是神经系统损伤引起的一种难以治愈的慢性痛状态。损伤发生后不仅引起神经病理性疼痛，同时还存在神经修复作用、神经再生的过程，提示神经病理性疼痛与神经修复再生之间存在某种联系，所以在探索神经损伤新的治疗方法的同时也必须考虑到对神经修复和再生的影响。

卫星胶质细胞(Satellite Glial Cells，SGCs)是背根神经节中围绕在感觉神经元周围的一群细胞，具有同中枢神经系统中的星形胶质细胞的作用，是外周神经系统中一种重要的神经胶质细胞，广泛分布在背根神经节(dorsal root ganglia，DRG)和三叉神经节(trigeminal ganglia，TG)中，对神经元起支持、保护、营养等作用。最初人们认为卫星胶质细胞仅仅为神经元提供结构支撑、营养支持，从而促进神经元的生长发育。

proBDNF(precursor for brain-derived neurotrophic factor)是成熟脑源性神经营养因子的前体形式，裂解后形成成熟BDNF。脑源性神经营养因子前体不仅可以作为脑源性神经营养因子的前体形式，它也可以由神经细胞突触分泌到细胞外区域，与脑源性神经营养因子起着不同的作用。proBDNF与神经损伤后神经元的死亡及神经退行性变等神经系统疾病都有关，其作用方式和传导通路与成熟的BDNF也不尽相同。

目前尚无文献报道卫星胶质细胞能够转分化为神经元。本发明在前期成功建立一种稳定的、高效的、高纯度的DRG-SGCs体外原代培养模型后，又研究了卫星胶质量细胞的转分化过程，并且成功获得了神经元。

发明内容