[发明专利]一种软组织细胞外基质提取方法有效
申请号: | 201911349941.5 | 申请日: | 2019-12-24 |
公开(公告)号: | CN110904030B | 公开(公告)日: | 2023-09-08 |
发明(设计)人: | 别拓铭;杜霖;易静楠;官习鹏 | 申请(专利权)人: | 广州悦清再生医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/079 |
代理公司: | 深圳珠峰知识产权代理有限公司 44899 | 代理人: | 黄伟 |
地址: | 510530 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 软组织 细胞 基质 提取 方法 | ||
1.一种软组织细胞外基质提取方法,包括以下步骤:
1)将经过前处理后的动物软组织浸入处理液中溶胀1-60min,冷却至-18-4℃,用频率为15-40kHz,功率为30-300W的超声处理0.5-30min;
2)将材料转移至水或PBS溶液中,用频率为15-40kHz,功率为3-50W的超声处理0.5-1min;
3)将处理完成的材料用水或PBS溶液洗净,得细胞外基质材料;
其中,所述动物软组织为角膜、结膜、羊膜、脊髓、神经;所述处理液为含0.05-2%wt表面活性剂和0.01%-50%wt助剂的水溶液,所述表面活性剂包括十二烷基硫酸钠、硫代甜菜碱10、曲拉通X-100、脱氧胆酸钠中的至少一种,所述助剂为丙三醇、丙二醇、山梨醇、丁二醇、氯化镁、氯化钙中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于:所述动物软组织为缝合力≤10N的动物组织。
3.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于:所述动物软组织在浸入处理液前是经除去多余组织、洗净、消毒处理的动物软组织。
4.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于:所述步骤1)和2)中的超声处理独立选自连续或脉冲超声。
5.根据权利要求4所述的提取方法,其特征在于:所述脉冲超声的处理工艺为1-5s开,关时长每次比开时长至少多1s。
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