[发明专利]一种矾根“提拉米苏”快速繁殖的组织培养方法

权利要求书

1.一种矾根“提拉米苏”快速繁殖的组织培养方法，其特征在于，包括无菌体系建立、诱导愈伤组织、诱导愈伤组织形成不定芽、不定芽增殖、诱导生根、炼苗移栽，具体步骤如下，

（1）无菌体系建立：选取生长健壮且无病虫害的母株，自母株上切取新生叶片的叶柄，对叶柄进行消毒，得到消毒后的外植体；

（2）诱导愈伤组织：将（1）得到的外植体接种到诱导愈伤组织的培养基上，培养后得到与外植体一体的愈伤组织；

诱导愈伤组织的培养基配方为：MS培养基，6-苄氨基腺嘌呤(6-BA) 0.1-0.2mg/l,2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D) 0.8-1.0mg/l,蔗糖 25-30g/l, 琼脂4-4.5g/l，pH值在5.8-6.0；培养温度23-27℃，光照强度1500-1800lux，光照时长9-10h/d；

（3）诱导愈伤组织形成不定芽：将（2）得到的愈伤组织从外植体上切除，并转接到诱导分化形成不定芽的培养基上，培养后得到与愈伤组织一体的不定芽；

诱导分化形成不定芽的培养基配方为：MS培养基，6-BA 1.5-2.0mg/l,2,4-D 0.1-0.2mg/l,蔗糖 25-30g/l, 琼脂4-4.5g/l，pH值在5.8-6.0；培养温度23-27℃，光照强度1500-1800lux，光照时长9-10h/d；

（4）不定芽增殖：经（3）得到的健康不定芽从愈伤组织切除，并转接到不定芽增殖的培养基中，培养后得到增殖的小苗；

不定芽增殖的培养基配方为：MS培养基，6-BA 0.05-0.1mg/l,萘乙酸（NAA）0.05-0.1mg/l,蔗糖 25-30g/l, 琼脂4-4.5g/l，pH值在5.8-6.0；培养温度23-27℃，光照强度1500-1800lux，光照时长9-10h/d；

（5）诱导生根：将（4）得到的3-4cm的小苗转接到诱导生根的培养基上，得到生根的小苗；

诱导生根的培养基配方为：1/2 MS培养基，蔗糖 25-30g/l, 琼脂4-4.5g/l，pH值在5.8-6.0；培养温度23-27℃，光照强度1500-1800lux，光照时长9-10h/d；

（6）炼苗移栽：将（5）得到的小苗炼苗，并移栽到栽种基质上。

2.根据权利要求1所述的一种矾根“提拉米苏”快速繁殖的组织培养方法，其特征在于，步骤（1）中取材前7-10天向母株喷洒800-1000倍的多菌灵；取材时选择切取30-40天的新生叶片的叶柄；叶柄的消毒为先用75％酒精对叶柄消毒，再将叶柄于0.1％氯化汞溶液中浸泡6-8min。