[发明专利]用于单细胞固定并原位进行医学分析的微流控芯片装置及其应用有效
申请号: | 201911326487.1 | 申请日: | 2019-12-20 |
公开(公告)号: | CN111019805B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 秦玉岭;吴丽;刘金霞;冀海伟;周晓波 | 申请(专利权)人: | 南通大学 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12Q1/6844 |
代理公司: | 南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙) 32249 | 代理人: | 秦秋星 |
地址: | 226019 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 单细胞 固定 原位 进行 医学 分析 微流控 芯片 装置 及其 应用 | ||
1.一种用于单细胞固定并原位进行医学分析的微流控芯片,包括进样口、细胞阵列和出样口,所述细胞阵列是由若干个重复微阵列单元构成的矩阵结构,其特征在于,所述微阵列单元包括单元入口、细胞捕捉卡口、核酸扩增反应室和单元出口,所述核酸扩增反应室由若干个栅栏围绕而成,栅栏之间存在间隙,所述间隙只能通过细胞液、细胞分散液或核酸扩增试剂,不能通过油相;栅栏外围为导流油相的导流渠道,导流渠道分别与单元入口和单元出口连通;
所述栅栏结构为以位于单元入口与单元出口的中心连线为对称线的对称结构,包括位于所述中心连线两侧的横向的第一栅栏和竖向的第二栅栏;所述第一栅栏包括两段,靠近单元入口的一段向单元入口方向弯折,构成第一段导流结构,另一段平行于所述中心连线;细胞捕捉卡口位于所述中心连线上,第一段导流结构之后;所述第二栅栏与第一栅栏之间存在间隙,两个第二栅栏之间存在间隙,第二栅栏的靠近所述中心连线的一端向单元出口方向偏移,构成第二段导流结构。
2.根据权利要求1所述的一种用于单细胞固定并原位进行医学分析的微流控芯片,其特征在于,还包括以所述中心连线为对称线对称设置的两个第三栅栏,第三栅栏位于细胞捕捉卡口的前方,其为竖向,且靠近所述中心连线的一端向细胞捕捉卡口偏移,构成第三导流结构。
3.根据权利要求2所述的一种用于单细胞固定并原位进行医学分析的微流控芯片,其特征在于,两个所述第三栅栏远离细胞捕捉卡口的一侧呈150度夹角,将单元入口流入的水相导流至细胞卡口。
4.权利要求1所述的微流控芯片的应用方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:向进样口通入细胞液,将微流控芯片内全部填充;
步骤2:细胞分散液从进样口注入;
步骤3:待细胞进样结束后,通入细胞核酸扩增所需要的试剂,将原有的细胞液全部取代;
步骤4:从出样口注入油相,油相将含有细胞的阵列单元分割成独立空间;
步骤5:待观测到进样口有油相流出后,表示进样结束,关闭油相进样器;
步骤6:用玻璃片或胶带封盖进出样口,转移芯片至后续实验。
5.根据权利要求4所述的应用方法,其特征在于,所述油相为硅油。
6.根据权利要求4所述的应用方法,其特征在于,步骤2中,细胞分散液的流速在0.5-10ul/min。
7.根据权利要求4所述的应用方法,其特征在于,步骤3中,试剂的流速为0.5-10 ul/min。
8.根据权利要求4所述的应用方法,其特征在于,步骤4中,油相的流速为流速0.5-5ul/min。
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