[发明专利]用于癌症治疗的多靶向siRNA

说明书

本发明提供了用于癌症治疗的多靶向siRNA，具体地，本发明提供了一种siRNA组合物，包括：降低第一靶基因的表达的第一siRNA分子；任选的，靶向肽元件的编码序列；和任选的，降低第二靶基因的表达的第二siRNA分子；其中所述第一靶基因选自下组：EGFR、KRAS、或其组合，并且所述siRNA组合物降低两个或更多个基因的表达。此外，本发明还提供了含有所述siRNA组合物的载体。本发明的siRNA或载体可直接注射入体内治疗癌症。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及用于癌症治疗的多靶向siRNA。

背景技术

siRNA能够特异性结合mRNA在转录后水平干扰基因的表达。因此为了将siRNA药物直接送达既定的靶细胞、靶组织或者靶器官，不可避免的要通过血液循环系统来进行药物递送。而在体内如何将siRNA安全、有效、稳定地递送到靶细胞或者靶器官，也是开发siRNA药物最为关键的问题。目前siRNA药物的体内递送策略主要可以分为裸siRNA直接递送、病毒性载体、化学修饰、纳米颗粒、脂质体等几大类。以合成的未经修饰的裸siRNA为例，经静脉注射后，siRNA需要随血液循环流动直到抵达靶细胞。这期间，很大一部分siRNA会被肾脏过滤清除出体外，有一部分将被吞噬细胞处理掉。而采用化学修饰、纳米、脂质体或病毒载体的递送方式，均存在其各自的安全性问题。

近年来，另外一项进展迅速的递送方式是基于外泌体的siRNA传输技术，其优势在于外泌体可以包裹和保护miRNA(siRNA类似物)自由穿越细胞膜和生物屏障并达到受体细胞，是在细胞间、组织间传递miRNA的天然载体。该方法已被广泛报道在多种疾病模型上获得成功，但是这些实验往往是不计成本和代价的，而在实际操作过程中，将siRNA包装进入外泌体需要大规模的细胞培养，耗时耗力，而且花费十分昂贵，此外分离纯化外泌体也需要耗费大量的人力物力，因此大批量生产外泌体siRNA并不现实。另一方面，由于生产外泌体siRNA的过程繁复，对细胞状态、分离过程、人员操作都有较高要求，难以保证批次之间的一致性，因此很难满足生产质控的要求，无法实现工业化生产。

合成生物学是指利用工程学概念和系统设计理论设计创建元件(parts)、器件(devices)或模块(modules)，以特定产物为目标，将各种标准化的功能元件组装在一起，同时经过整体路径的优化调控，形成具有预定功能的全新人工生物体系，实现合成生物体系在化学品、医药、重大疾病的诊断与治疗、农业、能源、环境等领域的规模化应用。在药物研发领域，合成生物学为新型生物医药技术的开发提供了安全、高效、可控的实验工具和验证方法，已经被应用于体内文库构建、药物发现、药物合成、药物输送和药物优化等方面。

因此，本领域迫切需要开发一种直接利用人工设计的质粒系统进行体内治疗的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种直接利用人工设计的质粒系统进行体内治疗的方法。

在本发明的第一方面，提供了一种siRNA组合物，包括：

降低第一靶基因的表达的第一siRNA分子；

任选的，靶向肽元件的编码序列；和

任选的，降低第二靶基因的表达的第二siRNA分子；

其中所述第一靶基因选自下组：EGFR、KRAS、或其组合，并且所述siRNA组合物降低两个或更多个基因的表达。

在另一优选例中，所述第二靶基因选自下组：EGFR、TNC、或其组合。

在另一优选例中，所述第一靶基因和第二靶基因不同。

在另一优选例中，所述第一siRNA分子具有如SEQ ID NO.:1或2所示的序列。

在另一优选例中，所述第一siRNA分子的序列如SEQ ID NO.:1或2所示。