[发明专利]一种新型玻璃化冷冻复融观察装置及其应用

说明书

本发明公开了一种新型玻璃化冷冻复融观察装置及其应用，包括立式显微镜、底座、圆环形容器、观察载体和载体移动器；所述底座置于所述立式显微镜的置物台上，所述底座的中部右侧镶嵌一个扇形的可调控温度的恒温发热底板；所述圆环形容器的内部通过隔板分割为5个扇形小格；所述观察载体的左侧表面设有一圆柱体凹槽，所述圆柱体凹槽用于盛载待观察的液滴；所述载体移动器用于移动观察载体。通过本发明实现可便捷地观察快速冷冻和复融过程中不同玻璃液的玻璃化状态，完成初步玻璃态筛查工作及复融温度的优化，具有快速、简单方便的特点，极大减少无效工作。同时提高观察准确度。

技术领域

本发明涉及玻璃液观察领域，具体涉及一种新型玻璃化冷冻复融观察装置及其应用。

背景技术

组织冷冻保存在生殖医学领域中的应用价值己得到公认，并取得了一些成就，但进展仍然缓慢，其中玻璃化冷冻法最早于2002年应用于在卵巢组织冷冻保存研究中，原理是高浓度冷冻保护液在快速降温时可形成玻璃化液，无细胞内外冰晶形成，更适合冷冻保存结构复杂的人卵巢组织，2013年第一例玻璃化冻存卵巢组织片自体移植后婴儿出生。玻璃液浓度越高，玻璃态越易形成，但随浓度升高其对组织毒性也越大，如何筛选出最适合人卵巢组织的玻璃液配伍及浓度就成为提高人卵巢组织冷冻保存效果的关键步骤；同时玻璃液在复融的过程中也可能会有冰晶的形成，如何快速确定最合适的复融温度也是提高冷冻效果的重要环节。

目前常用筛选最优玻璃液及组织平衡时间的方法有：①组织形态学分析；②移植后或体外培养性激素水平的测定；③组织细胞内超微结构变化；④组织细胞的凋亡情况；⑤卵泡的增殖发育能力等。这些方法检测周期长，不灵活，不能及时发现玻璃液配伍的问题，极易使后续检测成为无效工作。

发明内容

针对上述问题，本发明主要解决的技术问题是提供一种新型玻璃化冷冻复融观察装置，所述新型玻璃化冷冻复融观察装置应用在最优玻璃液筛选和复融温度的优化时，可便捷地观察快速冷冻和复融过程中不同玻璃液的玻璃化状态，完成初步玻璃态筛查工作及复融温度的优化，具有快速、简单方便的特点，极大减少无效工作。同时提高观察准确度。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种新型玻璃化冷冻复融观察装置，包括立式显微镜，所述立式显微镜连接拍摄装置；还包括底座、圆环形容器、观察载体和载体移动器；

所述底座置于所述立式显微镜的置物台上，所述底座的中部右侧镶嵌一个扇形的可调控温度的恒温发热底板，所述恒温发热底板电性连接控制装置；

所述圆环形容器的内部通过隔板分割为5个扇形小格，分别是第一扇形小格、第二扇形小格、第三扇形小格、第四扇形小格和第五扇形小格；所述第一扇形小格和所述第二扇形小格之间的所述隔板的下部为中空设计，所述第一扇形小格和所述第二扇形小格的底部相连通；所述第三扇形小格和所述第五扇形小格为空气隔层；所述第四扇形小格的底部形状与所述恒温发热底板相吻合；还设有与所述第一扇形小格相配合的扇形盖子；

所述观察载体的左侧表面设有一圆柱体凹槽，所述圆柱体凹槽用于盛载待观察的液滴；所述载体移动器用于移动观察载体。

优选的，所述底座的上表面设有与所述圆环形容器相配合的圆形凹位。如此设置，便于圆环形容器通过圆形凹位快速准确地与底座相配合，同时防止观察过程中圆环形容器移位。

优选的，所述观察载体采用耐低温防雾玻璃材质。如此设置，考虑到观察载体放置于超低温的液氮中，采用耐低温材质，延长观察载体的寿命

优选的，所述观察载体的右侧边位处设有两个长方体凹槽，所述长方体凹槽为上下对称设置，所述长方体凹槽内镶嵌有磁铁；所述载体移动器为V字形的镊子，所述镊子的两侧的展开端均设有与所述长方体凹槽相配合的齿状凸起，所述齿状凸起为铁素体不锈钢材质。如此设置，通过铁素体不锈钢材质的齿状凸起与镶嵌有磁铁的长方体凹槽相配合，利用磁力相吸，防止移动过程中观察载体中途掉落。