[发明专利]C3

权利要求书

1.一种负载全无机钙钛矿CsPbBr₃的C₃N₄纳米球复合材料的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取0.2035g Cs₂CO₃、5～10mL十八烯、0.5～0.625mL油酸混合后真空干燥；然后在惰性气体氛围中加热至固体完全溶解形成前驱体溶液；

(2)取0.138g PbBr₂、1～5mg中空介孔C₃N₄纳米球、5～10mL十八烯混合后真空干燥；加入油胺和油酸，并在惰性气体氛围中加热到120℃～150℃，形成高温反应液；

(3)取1.0mL步骤(1)中制备的前驱体溶液加入到步骤(2)中的高温反应液中，所述前驱体溶液与高温反应液的体积比为：1:5～10；反应3～5s后置于冰水浴中冷却终止反应，制得粗产物。

2.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤(3)所制得的粗产物的后处理方法为离心后，收集离心固体洗涤，分散在甲苯中保存备用。

3.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)在惰性气体氛围中加热至150℃直至固体完全溶解形成前驱体溶液。

4.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)和步骤(2)真空干燥的条件为：置于100℃下真空干燥箱中1h；惰性气体氛围为N₂氛围。

5.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(2)中，油胺和油酸预先置于100℃下真空烘箱中干燥1h。

6.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤(2)中在惰性气体氛围中加热到120℃保持40min，然后继续加热至150℃，形成高温反应液。

7.如权利要求1所述的合成方法合成的负载全无机钙钛矿CsPbBr₃的C₃N₄纳米球复合材料在检测细胞数量中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

a)电极的制备过程：用所述负载全无机钙钛矿CsPbBr₃的C₃N₄纳米球复合材料、捕获DNA依次修饰玻碳电极；

b)探针的制备过程：将连接DNA与功能DNA等摩尔混合后置于37℃恒温震荡器中反应；然后加入靶向识别分子、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺在37℃恒温震荡仪中反应；通过离心提纯制得探针；

c)细胞表面受体的评估过程：取步骤b)制得的探针与细胞在37℃的培养箱中温育，离心收集沉淀，洗涤后，分散在pH＝7.4的磷酸盐缓冲液中；随后加入限制性内切酶DraI在37℃恒温器中特异性地切割细胞表面的DNA探针40min，离心收集上清液分别加入发卡DNA1和发卡DNA2，并置于37℃恒温震荡器中进行杂交链式反应；最后加入罗丹明6G，并在室温下反应；

d)电致化学发光发光检测过程：将步骤c)中形成的反应产物滴加到步骤a)中所制备的电极表面，并在室温下反应后，进行电致化学发光信号的测量；以阴极恒定的C₃N₄球的电致化学发光信号作为内标，阳极变化的CsPbBr₃的电致化学发光信号作为指示信号，通过两种信号的比率实现内参比的分析策略，该比率与细胞浓度的呈现良好的线性关系；

所述步骤b)中的靶向分子特异性地靶向所述步骤c)的细胞表面受体；

所述连接DNA的核苷酸序列为：NH₂-C₆-TTT TTA AAA A；

所述功能DNA的核苷酸序列为：CCA AAC CGA AAG AAC AAT GGA CCC CTC TCC TCT CCTCTC CTC TCC TCT CCT CTC TTT TTA AAA A；

所述发卡DNA1的核苷酸序列为：GGG TCC ATT GTT CTT TCG GTT TGG GTA GAG CCAAAC CGA AAG AAC AAT；

所述发卡DNA2的核苷酸序列为：CCA AAC CGA AAG AAC AAT GGA CCC ATT GTT CTTTCG GTT TGG CTC TAC；

所述捕获DNA的核苷酸序列为：SH-C₆-AAA AAA AAA AGA GAG GAG AGG AGA GGA GAGGAG AGG AGA G。