[发明专利]一种用SOSG检测MC540单线态氧产量的方法

说明书

本发明公开了一种用SOSG检测MC540单线态氧产量的方法，首先将待检测的MC540溶液与SOSG溶液按照体积比为40:1的比例混合，得到MC540混合液；然后对所得的MC540混合液进行照射，使其产生¹O₂；最后调节MC540混合液的pH值为11.7～12.7，进行荧光酶标仪检测。本发明通过调节经激发后的MC540溶液的pH值，改变了MC540的最大吸收波长，从而避开SOSG‑EP检测时需要的波长，解决SOSG‑EP的吸收和激发波长与MC540的吸收波长重合、SOSG‑EP无法被有效激发和检测的问题，可以通过SOSG准确定量检测MC540的¹O₂产量。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种用SOSG检测MC540单线态氧产量的方法。

背景技术

部花青540(MC540)是一种光敏剂，能吸收波长为540nm的可见光，从而改变自身结构，使光能转化为化学能，并将能量传递给周围的O₂，生成活性很强的单线态氧(¹O₂)。单线态氧能够破坏细胞内的生物大分子如磷脂、蛋白质、核酸等，进而导致细胞死亡。MC540的这一特点，使其在光动力治疗(PDT)的应用中具有广阔前景。而PDT的治疗效果和MC540产生¹O₂的量直接相关，因此，检测MC540的¹O₂产量可以作为预测PDT疗效的重要指标。

Singlet Oxygen Sensor(SOSG)可以结合溶液中的¹O₂，生成荧光物质SOSG-EP，后者能在波长504nm光的激发下，产生波长525nm的荧光，强度与¹O₂的量正相关，因此，可以通过酶标仪检测荧光强度，间接反应¹O₂的量。

然而，用SOSG检测MC540所产生的¹O₂存在严重的缺陷，即荧光物质SOSG-EP的吸收(504nm)和激发(525nm)波长与MC540的吸收波长(540nm)重合，使得SOSG-EP无法被有效激发和检测。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供了一种用SOSG检测MC540单线态氧产量的方法，解决现有的SOSG检测方法由于荧光物质SOSG-EP的吸收和激发波长与MC540的吸收波长重合而无法被有效激发和检测的问题。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案予以实现：

一种用SOSG检测MC540单线态氧产量的方法，包括以下步骤：

步骤1，将待检测的MC540溶液与SOSG溶液按照体积比为40:1的比例混合，得到MC540混合液；所得混合液中SOSG的浓度为1～10umol/L；

步骤2，对步骤1所得的MC540混合液进行照射，使其产生¹O₂；

步骤3，调节经过步骤2处理后的MC540混合液的pH值为11.7～12.7，取部分溶液进行荧光酶标仪检测。

优选的，所述的步骤3中使用NaOH溶液调节MC540混合液的pH值。

优选的，所述的NaOH溶液的浓度为0.01～0.1mol/L。

优选的，所述的步骤3中，使用波长为450～550nm、功率为50～100mW的激光作为激发光源，在距离溶液表面为1～10cm处进行照射，照射时间为1～10min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：