[发明专利]一种补肾健骨中药的HPLC指纹图谱检测方法

说明书

本发明一种补肾健骨中药的HPLC指纹图谱检测方法，所述补肾健骨中药由熟地黄、山茱萸、狗脊、淫羊藿、山药、当归、牡丹皮、牡蛎等中药材制成，该检测方法包括将样品提取后上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为220‑250nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C₁₈色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为含有0.05‑0.3％磷酸二氢钾和0.01‑0.1％辛烷磺酸钠的水溶液，采用梯度洗脱。本发明所建立的指纹图谱标出了9个共有峰，6号峰为淫羊藿苷的峰，经过方法学考察，这9个共有峰具有很高的稳定性、重复性和精密度，完全可用于指导生产和控制产品质量。

技术领域

本发明属于中药检测领域，涉及一种补肾健骨中药的HPLC指纹图谱检测方法。

背景技术

CN 1493325A公开了种主治肝肾不足证之原发性骨质疏松症的中药及其制备方法，该中药由熟地黄、山茱萸、狗脊、淫羊藿、山药、当归、牡丹皮、煅牡蛎八味中药材组成，商品名“补肾健骨胶囊”，是健民药业集团股份有限公司独家品种，目前针对该中药的质量控制普遍采用的是对单一成分进行定性或定量检测，然而这种质量控制存在很大的局限性，首先，它不能全面表征药物的质量，导致中药掺假、伪劣现象严重，使中药不仅无法保证疗效，还严重威胁用药安全，其次，这种方法还存在检测次数多，仪器多，检测耗时耗力，效率低下等缺点。因此，有必要建立中药更全面、效率更高的质量检测方法。

指纹图谱是一种可量化的检测中药材及中药制剂的方法，主要用于鉴别真伪和评价原药材、半成品及制剂质量的均一性和稳定性。与指标成分含量测定的质量分析方法相比，指纹图谱能够比较全面地反映中药化学成分的种类和数量，在中药复方制剂有效成分尚未完全阐明的现状下，可实现对中药内在质量的综合评价和对其整体物质的有效控制，是目前中药及其制剂质量控制的最有效手段。中药指纹图谱的检测方法有色谱法、光谱法、波谱法等。色谱法主要包括薄层色谱、高效液相色谱、气相色谱，其中高效液相色谱法具有高效、快速、灵敏、重现性好的特点，现已成为中药指纹图谱研究的主流方法。

发明内容

本发明的目的是为了全面、有效地控制产品质量，建立一种补肾健骨中药的HPLC指纹图谱检测方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术手段：

一种补肾健骨中药的HPLC指纹图谱检测方法，所述补肾健骨中药由以下重量份数的原料制成：熟地黄3-8份、山茱萸1-5份、狗脊1-5份、淫羊藿1-5份、山药1-5份、当归1-5份、牡丹皮1-4份、牡蛎2-6，该检测方法包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：将待测中药研细，30-70％甲醇超声提取，过滤，得供试品溶液；

(2)精密吸取供试品溶液，上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为220-250nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C₁₈色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为含有0.05-0.3％磷酸二氢钾和0.01-0.1％辛烷磺酸钠的水溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～40℃；

(3)记录供试品溶液0～50min的色谱图，利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液的色谱图分别经过数据导入、多点矫正和数据匹配，即得指纹图谱并进行相似度分析。

优选地，所述紫外检测器的设定检测波长为235nm。

优选地，所述流动相B为含有0.1％磷酸二氢钾和0.05％辛烷磺酸钠的水溶液。

优选地，所述梯度洗脱的程序如下：

表1梯度洗脱程序