[发明专利]木质纤维素降解复合菌系及其培养方法和应用

权利要求书

1.一种木质纤维素降解复合菌系，其特征在于：包括从腐烂秸秆中分离出的木霉、青霉、梭菌属、芽孢杆菌属及草螺菌属；

所述木霉、青霉、梭菌属、芽孢杆菌属、草螺菌属的质量百分比分别为20％～40％、20％～40％、5％～10％、20％～40％、5％～10％。

2.根据权利要求1所述木质纤维素降解复合菌系，其特征在于：所述木霉、青霉、梭菌属、芽孢杆菌属、草螺菌属的质量百分比分别为30％、30％、5％、30％、5％。

3.一种用于培养权利要求1或2所述木质纤维素降解复合菌系的复合菌培养基，其特征在于：

所述复合菌培养基为纤维素刚果红培养基，包括2.0g/L CMC—Na、2.0g/L(NH₄)₂S0₄、0.5g/L NaCl、1g/L K₂HPO₄、0.5g/L MgS0₄·7H2O、0.4g/L刚果红、12g/L琼脂；

CMC—Na通过CMC添加柠檬酸缓冲溶液加热溶解制得；

所述复合菌培养基的pH为7.0。

4.一种权利要求1或2所述木质纤维素降解复合菌系的发酵培养基，其特征在于，所述发酵培养基的成分为：

麦麸5％、玉米秸秆粉20％、酵母膏0.05％、蛋白胨0.3％、七水硫酸镁0.03％、磷酸二氢钾0.4％、二水氯化钙0.03％、硫酸铵1.5％、吐温-80 0.8％，余量为水。

5.利用权利要求1或2所述木质纤维素降解复合菌系制备复合菌酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)菌种培养

1.1)将木霉、青霉、梭菌属、芽孢杆菌属、草螺菌属分别在相应培养基上扩增和培养；

2)发酵过程

2.1)活化后的菌种接种到一级种子罐中通气培养，培养后再接种到二级种子罐中，培养后接种到发酵培养基中进行发酵，获得发酵液；

发酵培养基：麦麸5％、玉米秸秆粉20％、酵母膏0.05％、蛋白胨0.3％、七水硫酸镁0.03％、磷酸二氢钾0.4％、二水氯化钙0.03％、硫酸铵1.5％、吐温-80 0.8％，余量为水；

2.2)根据发酵液的pH值，以及镜检观察来确定菌的状态；

3)酶的提取分离与纯化

3.1)使发酵液温度维持在90℃，保持10min；

3.2)发酵液进行过滤、浓缩后，采用盐析进行酶分离；

3.3)使用纤维素酶抑制剂进行纯化，获得纯化的复合菌酶。

6.根据权利要求5所述木质纤维素降解复合菌系制备复合菌酶的方法，其特征在于：将木霉、青霉、梭菌属、芽孢杆菌属、草螺菌属活化后接种于发酵培养基中，28～30℃发酵7～10d，期间持续搅拌；接种量为7％。