[发明专利]针对CD20和CD3的双特异性抗体及其用途

权利要求书

1.一种双特异性抗体，所述双特异性抗体分子由两条相同的多肽链以共价键结合形成四价同源二聚体，其中，每条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO：50所示。

2.编码如权利要求1所述双特异性抗体的DNA分子。

3.如权利要求2所述的DNA分子，其具有如SEQ ID NO：51所示的核苷酸序列。

4.包含如权利要求2或3所述DNA分子的载体。

5.包含如权利要求4所述载体的宿主细胞，其为原核细胞、酵母或哺乳动物细胞。

6.如权利要求5所述的宿主细胞，其为CHO细胞。

7.一种药物组合物，所述组合物包含如权利要求1所述的双特异性抗体以及可药用赋形剂、载体或稀释剂。

8.制备如权利要求1所述双特异性抗体的方法，其包括：(a)获得双特异性抗体的融合基因，构建双特异性抗体的表达载体；(b)通过基因工程方法将上述表达载体转染到宿主细胞中；(c)在允许产生所述双特异性抗体的条件下培养上述宿主细胞；(d)分离、纯化产生的所述抗体；

其中，步骤(a)中所述表达载体选自质粒和病毒中的一种或多种；

其中，步骤(b)通过基因工程方法将所构建的载体转染入宿主细胞中，所述宿主细胞为原核细胞、酵母或哺乳动物细胞；

其中，步骤(d)通过常规的免疫球蛋白纯化方法，包含蛋白质A亲和层析和离子交换、疏水层析或分子筛方法分离、纯化所述双特异性抗体。

9.如权利要求8所述的方法，其中，步骤(a)中所述表达载体为pCDNA3.4载体。

10.如权利要求8所述的方法，其中，步骤(b)通过基因工程方法将所构建的载体转染入宿主细胞中，所述宿主细胞为CHO细胞或NS0细胞。

11.如权利要求8所述的方法，其中，步骤(b)通过基因工程方法将所构建的载体转染入宿主细胞中，所述宿主细胞为CHO细胞。

12.如权利要求1所述的双特异性抗体在制备治疗、预防或缓解肿瘤的药物中的用途，所述肿瘤选自：B细胞淋巴瘤。

13.如权利要求1所述的双特异性抗体在制备治疗、预防或缓解肿瘤的药物中的用途，所述肿瘤选自：滤泡性淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤、急性B淋巴细胞性白血病、慢性B淋巴细胞白血病、小淋巴细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

14.如权利要求1所述的双特异性抗体在制备治疗、预防或缓解自身免疫性或炎症性疾病的药物中的用途，所述自身免疫性疾病或炎症性疾病选自：类风湿性关节炎、多发性硬化症。