[发明专利]噬菌体vB_Yen_X1及在防治鼠疫杆菌感染中应用

说明书

本发明公开了一种噬菌体vB_Yen_X1及在防治鼠疫杆菌感染中应用，提供了一株新的小肠结肠炎耶尔森菌噬菌体vB_Yen_X1，具有较宽的杀菌谱，不仅可以感染、杀灭小肠结肠炎耶尔森菌，更重要的是对鼠疫耶尔森菌表现出极宽的感染和杀菌谱，可以单独或与其他物质复配使用，能够有效净化鼠疫疫源地、紧急预防和控制鼠疫耶尔森菌感染及其引发的鼠疫。

技术领域

本发明公开了一株新的小肠结肠炎耶尔森菌噬菌体vB_Yen_X1，该噬菌体可有效的净化鼠疫疫源地、紧急预防和控制鼠疫耶尔森菌感染及其引发鼠疫，属于生物工程技术领域。

背景技术

小肠结肠炎耶尔森菌（Yersinia enterocolitica）是一种革兰氏阴性杆菌或球杆菌，属肠杆菌科，耶尔森菌属。小肠结肠炎耶尔森菌是一类人畜共患病病原菌，也是非常重要的食源性致病菌，具有噬冷性，能够在冷藏环境下生长增殖。人感染后能够引起呼吸系统、胃肠道系统、心血管系统等疾病，也可能引起急性阑尾炎、败血症等。

鼠疫耶尔森菌（Yersinia pestis），属肠杆菌科、耶尔森菌属，俗称鼠疫杆菌，是引起鼠疫感人的病原菌。鼠疫是一种人兽共患的自然疫源性烈性传染病，具有很强的传染性和很高的死亡率，曾被用作生物战。鼠疫耶尔森菌主要寄生于啮齿类动物，以鼠蚤为传播媒介。临床上常见的鼠疫耶尔森菌感染有腺型、败血症型和肺型三种类型：其中腺型鼠疫最常见，多发生于流行初期，可引起出血坏死性淋巴结炎；败血症型鼠疫可原发或继发；肺鼠疫可直接造成肺部感染，使患者死于休克、心力衰竭等。由鼠疫引发的死者皮肤常呈黑紫色，故有“黑死病”之称。敏感的抗生素可以有效控制鼠疫耶尔森菌的感染，但是目前没有有效净化鼠疫疫源地、紧急预防和控制鼠疫耶尔森菌感染及其引发鼠疫的方法。

噬菌体是一类能感染细菌、真菌、放线菌和分枝杆菌等微生物的病毒，于1915年由英国生物学家和1917年加拿大微生物学家各自独立发现。噬菌体能够特异性的感染并杀死细菌，可被用于预防和控制细菌感染噬菌体可以特异性感染细菌，并在细菌细胞内进行复制，组装合成子代噬菌体，以指数形式成倍增加，最终将细菌杀死，释放子代噬菌体颗粒。近几年，随着对噬菌体生物学特性和感染特性认识的深入，噬菌体作为治疗制剂的研究也越来越多。耶尔森菌对氨苄西林和头孢类抗生素天然耐药，对其他抗生素也有不同程度的耐药性。与抗生素相比，噬菌体最大的特点是：特异性，不影响正常菌群；机制不同，对耐药菌株同样有效；高效性，可以快速的杀灭特定病原菌；具有放大效应，通过感染和杀灭特定细菌能够达到自身的增殖；种类多，自然界中存在大量的噬菌体，约10³¹种；易获得，研发周期短。因此，噬菌体在治疗、预防和控制细菌感染及其引发疾病方面具有较高的应用潜力。同时，由于噬菌体特异性强，其杀菌谱较窄，在一定程度上限制了其实际应用，分离获得具有广谱、高效杀菌能力的噬菌体是实现其应用的关键所在。因此，分离获得对鼠疫耶尔森菌具有广谱、高效杀菌活性的噬菌体，开发利用噬菌体有效净化鼠疫疫源地、紧急预防和控制鼠疫耶尔森菌感染及其引发的鼠疫具有十分重要的意义。

发明内容

本发明公开一株噬菌体vB_Yen_X1，具有较宽的杀菌谱，不仅可以感染、杀灭小肠结肠炎耶尔森菌，更重要的是对鼠疫耶尔森菌表现出极宽的感染和杀菌谱，可以单独或与其他物质复配使用，能够有效净化鼠疫疫源地、紧急预防和控制鼠疫耶尔森菌感染及其引发的鼠疫。

本发明提供的一株小肠结肠炎耶尔森菌噬菌体vB_Yen_X1，是以小肠结肠炎耶尔森菌为宿主菌分离的新噬菌体保藏名为Yersinia enterocolitica phage vB_Yen_X1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO: M 2019504；保藏时间为：2019年7月1日。

本发明还提供了上述噬菌体的分离与纯化方法及其一般生物学特性。

本发明进一步公开了一种用于杀灭鼠疫耶尔森菌及控制鼠疫流行的药物组合物，以噬菌体vB_Yen_X1作为活性成分。