[发明专利]一种嵌入式Au纳米薄膜电极表面等离子体共振免疫分析的方法

权利要求书

1.一种嵌入式Au纳米薄膜电极表面等离子体共振免疫分析的方法，其特征在于具体步骤为：

(1)将事先裁好的ITO导电玻璃分别用分析纯丙酮、分析纯乙醇和二次水各超声清洗3min，并置于50℃烘箱中烘干；将烘干后洁净的ITO置于由70％H₂SO₄和30％H₂O₂配制成的食人鱼溶液中浸泡，取出后用去离子水冲洗并超声清洗，氮气吹干；将烘干后的ITO置于10％KH550的乙醇溶液中浸泡2h，取出用乙醇超声清洗，氮气吹干，在120℃恒温箱中放置1小时，烘干待用；

(2)通过柠檬酸盐还原法合成金纳米溶胶，将1％氯金酸稀释100倍，取100mL稀释后的浓度为0.01％的氯金酸水溶液至圆底烧瓶油浴加热至沸，在搅拌的状况下快速加入2mL1％的柠檬酸三钠溶液作为还原剂，之后继续加热30min，观察溶液由淡黄色转灰再变为黑，最后变成橙红色，停止加热冷却至室温并储存在冰箱中直至使用；

(3)将步骤(1)中处理好的ITO浸泡在步骤(2)制备的金纳米溶胶中，浸泡24h；此后，将Au纳米薄膜电极置于管式炉中，通入氮气，等空气排尽后，在650℃下热退火5小时，等电极冷却至室温后，取出待用；

(4)将步骤(3)制备好的纳米金ITO电极放入不同浓度的鼠抗人IgG溶液中，37℃恒温水浴1小时后，4℃冰箱放置过夜，再用PBST洗涤液冲洗电极表面，除去未结合的包被液；之后放入封闭液中，封闭液为5％脱脂奶粉-PBST溶液，37℃恒温水育1小时后用PBST洗涤液冲洗；得嵌入式Au纳米薄膜电极表面等离子体共振免疫传感器。

2.一种利用上述方法制备的嵌入式Au纳米薄膜电极表面等离子体共振免疫分析的方法，当嵌入式Au纳米薄膜电极表面未结合鼠抗人IgG并插入RI＝1.333的溶液中，利用紫外-可见吸收光谱进行测试，得到的LSPR峰波长W₀；当嵌入式Au纳米薄膜电极表面结合不同浓度的鼠抗人IgG并插入RI＝1.333的溶液中，得LSPR峰波长W，以W-W₀为分析信号，进行鼠抗人IgG的测定；

由于上述方法制备的嵌入式Au纳米薄膜电极，可以利用表面等离子体共振进行免疫分析，因此，本发明提供了上述的嵌入式Au纳米薄膜电极在检测鼠抗人IgG中的应用。