[发明专利]一种生产和提取色氨酸的工艺有效
申请号: | 201910980680.0 | 申请日: | 2019-10-16 |
公开(公告)号: | CN110592154B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 张宗华;边恩来;赵仁楷;王飞;韩富江 | 申请(专利权)人: | 新疆阜丰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P13/22 | 分类号: | C12P13/22;C12N1/20;C07D209/20;C12R1/19 |
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地址: | 830026 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市经济*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 提取 色氨酸 工艺 | ||
1.一种生产和提取色氨酸的工艺,其包括发酵工序和提取工序;
所述发酵工序包括如下步骤:将产L-色氨酸的大肠杆菌工程菌种子液以1%-10%接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中发酵培养40h,得到发酵液;
所述提取工序包括如下步骤:发酵液进行灭菌,经陶瓷膜过滤得到滤液;将滤液泵入色谱系统,进行L-色氨酸和其他杂质的分离;然后通过脱色膜,过滤除去色素和蛋白,收集脱色液;将所得脱色液进行反渗透膜脱水浓缩,得到L-色氨酸洗脱液,将其打入四效蒸发器,真空浓缩为原体积的四分之一,所得浓缩液进行冷却结晶,离心、烘干得到L-色氨酸产品;
所述发酵工序中,通过流加培养液来提高色氨酸产量,具体包括如下:
1)在发酵培养30h,于每升发酵液中以1.0- 3.0ml/h的流速往发酵罐中补料流加磷酸氢二钾溶液,直至发酵结束;
所述磷酸氢二钾溶液的浓度为5.0%w/v;
2)在发酵培养30h,于每升发酵液中以0.5-1.5ml/h的流速往发酵罐中补料流加硫酸铵溶液,直至发酵结束;
所述硫酸铵溶液的浓度为10.0%w/v;
3)在发酵培养30h,于每升发酵液中以1.0-2.0ml/h的流速往发酵罐中补料流加精氨酸水溶液,直至发酵结束;
所述精氨酸水溶液的浓度为5.0%w/v;
4)在发酵培养30h,于每升发酵液中以2.0-4.0ml/h的流速往发酵罐中补料流加丙二酸和三氟乙酸的混合水溶液,直至发酵结束;
所述丙二酸和三氟乙酸的混合水溶液中,丙二酸的浓度为10-20%v/v,三氟乙酸的浓度为10-20%v/v。
2.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述发酵培养的参数为:转速300-500rpm,温度35-37℃,罐压0.05-0.08MPa,pH值通过氨水控制在6.5-6.8,流加浓度为400-500g/l葡萄糖溶液控制残糖浓度为1-1.5g/L,溶氧量:在0-12h控制在25-30%,在13-40h控制在15-20%。
3. 根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述发酵培养基的组分为:葡萄糖20g/L、大豆蛋白胨5g/L、磷酸氢二钾9g/L、柠檬酸3.5g/L、硫酸铵3.0g/L、七水硫酸镁0.5g/L、七水硫酸亚铁20mg/L、一水硫酸锰10mg/L、生物素0.1 mg/L。
4.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述陶瓷膜为Al2O3微滤膜,截留分子量为2000-10000Da。
5.根据权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述反渗透膜为聚酰胺复合膜,压力为0.5-0.6MPa,温度为50-60℃。
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