[发明专利]一种食品中红木素的定性定量检测方法

说明书

本发明公开了一种食品中红木素的定性定量测定方法，用5％醋酸乙腈溶液均质提取样品中的红木素，提取液经十八烷基硅烷键合相(C18)和弗罗里硅土(Florisil)基质分散净化后，提取液注入超高效液相色谱‑四级杆‑飞行时间/质谱仪(UPLC‑Q‑TOF/MS)测定。进行一级、二级扫描并与建立的数据谱库比较，经确证含有红木素的样品再进行定量，采用不含待测红木素的空白基质溶液建立校正的标准曲线，外标法定量。本方法平均回收率为73.2％～92.1％，平均相对标准偏差(RSD)为6.3％～8.9％，检出限为1.0mg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足国际食品法典委员会、欧盟、加拿大等对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

技术领域

本发明涉及一种食品中红木素的定性定量检测方法，属于食品添加剂的测定技术领域。

背景技术

红木素是以红木(胭脂树)种子为原料，经溶剂提炼、精加工而成的天然色素，为红褐色粉末或橙褐色液体，溶于动物油脂、丙二醇、丙酮，不溶于水。应用于食品中呈现诱人的橙黄色色调，色泽不受PH值的影响，色泽光亮鲜艳，着色力强，抗光性及耐热性较好，是一种重要的食用天然色素，在国内外食品工业上受到广泛的应用，也是我国批准允许使用的食用天然色素。各国在食品中使用红木素的限量和使用范围都不相同，国际食品法典委员会规定红木素只允许使用于黄油，限量为20mg/kg；欧盟允许使用于乳酪、黄油、谷物食品、酒类、焙烤食品、甜点等，限量为10-50mg/kg；澳大利亚还允许使用在包括饮料、葡萄酒、白酒、腌制鱼类等食品中；香港，美国虽然允许使用红木素，但没有具体的限量规定；日本也没有具体限量规定，但不允许使用在新鲜鱼、贝、海带、海苔、新鲜肉、紫菜、茶叶或蔬菜内；加拿大允许使用在乳制品、干酪、果酱、香肠等多种食品中，仅在肠衣和香肠中设置了限量分别为75、100mg/kg；中国台湾地区则不允许使用红木素。目前我国《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》(GB 2760-2014)中规定：红木素可用于干酪，限量为0.6g/kg；人造奶油0.05g/kg；糖果、果酱、饮料、果冻0.6g/kg；糕点0.015g/kg；肉灌肠类、西式火腿、巧克力0.025g/kg；复合调味料0.1g/kg；膨化食品、面糊、裹粉、煎炸粉0.01g/kg；方便米面制品0.012g/kg；即食谷物类食品0.07g/kg；粉圆0.15g/kg。

目前，有关食品中红木素含量检测方法的报道均采用液相色谱法，如国外Noppe等采用液相色谱法检测肉制品中的红木素和降红木素，采用乙腈直接提取肉中色素，二极管阵列456、 486nm检测，定量限为0.5mg/kg，线性范围为0.5-10mg/kg；国内林钦等采用酸化乙腈溶液提取，经乙腈饱和正己烷净化后注入超高效液相色谱仪检测，检测限为0.1mg/kg。高效液相色谱由于其检测器的通用性，杂质干扰严重，无法阐明化合物的结构裂解信息，定性差，容易产生假阳性或假阴性的结果。

超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)，是一种高分辨质谱，可对化合物进行精确分子质量的测定，并依据所测得的化合物的精确分子质量对其进行确证分析，同时在碰撞诱导解离(CID)模式下，得到化合物及其碎片离子的分子式和精确分子质量，可进一步对化合物的结构和裂解规律加以确证，定性准确度很高。目前，未见此方法应用于食品中红木素含量的检测。

QuEChERS(Quick Easy Cheap EffectiveRugged and Safe的简称)是近年来发展起来的一种快速、环保、经济的前处理方法，可以有效的去除提取溶液中的干扰杂质，未见用于红木素等食品添加剂的检测分析。

目前，关于采用QuEChERS方法进行样品前处理，同时结合UPLC-Q-TOF/MS测定食品中红木素的检测方法未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种食品中红木素的定性定量检测方法。

为实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：