[发明专利]一种华紫珠组培苗瓶外生根方法

说明书

本发明涉及一种华紫珠组培苗瓶外生根方法，包括以下步骤：（1）植物组织消毒处理；（2）组培苗培养；（3）组培苗瓶外扦插；（4）扦插后管理。本发明建立了有效的华紫珠组培苗瓶外生根技术，该技术无需经过组培瓶内生根程序，生根和驯化同时进行，25~30 d幼苗基部长出大量根系，2个月后得到健壮的生根苗。本发明育苗周期短，生根率大于90%，移栽成活率大于95%，能够降低生产成本并且节省组培空间，对于华紫珠组培产业化水平提升具有重要意义。

技术领域

本发明涉及华紫珠的育苗方法，具体地说是涉及华紫珠组培苗瓶外生根方法。

背景技术

紫珠（Callicarpa L.）是马鞭草科、紫珠属落叶灌木，株型秀丽、枝叶繁茂、花色丰富、果实色彩鲜艳，珠圆玉润，可作为秋季的观果树种，用于基础栽植、草坪或林缘衬边；还可作为盆栽观赏和切花材料。该属植物多具有抗菌止血、解毒消炎、驱风祛湿和抗肿瘤之功效，叶片和根均可入药，药用历史悠久，作用广泛且疗效显著，还载入了国家药典。

华紫珠（C.cathayana）为马鞭草科紫珠属的植物，是中国的特有植物，生长于海拔1, 200米的地区，多生在谷地、山坡或丛林中。我国华紫珠野生华紫珠资源非常稀少，华紫珠种质资源亟待保护（西北农林科技大学学报(自然科学版), 2008, 36(2):134-142.）。目前华紫珠的资源保护、育种开发以及园林应用等方面处于相对落后的局面，尤其是在引种繁育方面研究力度严重不足，华紫珠尚未由人工引种栽培。

近年来，随着紫珠商业价值的日益凸显，相关产业的迅速发展以及市场需求量的不断提升，野生紫珠已经不能满足市场的需求。由于华紫珠扦插繁殖生根难，成苗率低于50%，无法在短期内获得大量无性系苗木；由于紫珠种子育苗存在最佳采种时间短以及种子不宜储藏等，使得无性繁殖成为其繁殖技术的首选。组织培养是一种快速有效的无性繁殖途径，能有效扩增优良品种，在短期内提供大量优质华紫珠苗木。然而现有研究和实践表明，华紫珠组培苗瓶内生根具有成本大、周期长等问题。近年来，国内外学者提出了组培苗瓶外生根技术，国内对组培苗瓶外生根已有诸多报道，涉及蓝莓（林业科技, 2013, 5: 4-6）、乌饭树（江苏林业科技, 2018, (2):29-33.）、花榈木（种子, 2018, 37(11):141-145.）、澳洲茶树（西部林业科学, 2018, 47(2):86-90）、沙棘（经济林研究, 2018(3):182-186.）、黑木相思（森林与环境学报, 2019, 39(1):21-26）等，但未见华紫珠瓶外生根技术的报道。

发明内容

发明目的：本发明提供了一种华紫珠组培苗瓶外生根的方法，为华紫珠规模化快繁提供技术支撑。

技术方案：为实现上述目的，本发明采用了以下的技术方案，一种华紫珠组培苗瓶外生根的方法，包括以下步骤：

（1）植物组织消毒处理：选取生长健壮、无病虫害的华紫珠的嫩茎作为外植体，然后将所选取的外植体剪切成10 cm长的带芽茎段，经洗洁精消毒10 min，再用1 %的次氯酸钠消毒10 min，最后用无菌水冲洗5次；

（2）组培苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将步骤（1）中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位后，剪成1~2 cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中，然后将其置于普通日光灯为光源的环境下，光照强度为1500~2000 Lx，每日光照时间为16 h，温度20 ± 2 ℃，相对湿度60~65 %，在该培养基中可以获得健壮的增殖苗，20 d后长成6~8 cm的健壮无菌试管苗可进入下一步骤；

（3）组培苗瓶外扦插：将步骤（2）中株高达6~8 cm且叶片展开的组培苗开瓶培养2d进行炼苗即从组培室中移至炼苗室，在自然光条件下先放置2 d，后将瓶盖每天打开2次，上午下午各1次，每次打开时间为1 h，持续2 d；将完成炼苗的组培苗从瓶中取出，洗净，按单株剪下，每株剪成3~4 cm带芽茎段待扦插；扦插前蘸取生根水，扦插深度以1~1.5 cm，其中扦插的基质选用泥炭；