[发明专利]一种土牛膝抗炎活性提取物及其制备方法

权利要求书

1.一种土牛膝抗炎活性提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

A、选取土牛膝的根及根茎作为植物原料，将植物阴干粉碎后，通过20目筛网得到细粉，将细粉用70%~100%醇溶液，回流提取2h后，重复提取3次，在60℃下减压浓缩，在阴暗低温及通风较好的地方晾干，制得醇中间提取物；所述醇溶液为甲醇或乙醇；

B、将步骤A得到的醇中间提取物130g用甲醇充分溶解，所述醇中间提取物分离采用全亲水性材料ODS -AQ反相柱，其用量为与浸膏比0.9～1.5倍，以干燥为准，之后与反相硅胶搅拌，水浴锅挥干溶剂，所述水浴锅挥干溶剂过程是在小于等于60℃条件下干燥，后经规格为4*10cm的ODS柱层析，利用醇类-水溶液梯度洗脱，其中水、10%醇溶液、30%醇溶液、50%醇溶液、70%醇溶液、90%醇溶液、纯醇溶液、丙酮分别洗脱2.0L，并合并30%-70%醇溶液洗脱组分得到土牛膝抗炎活性提取物，所述土牛膝最终抗炎提取物的使用浓度为6.25-200μg/ml；

所述提取物中包含蜕皮甾酮、R-牛膝甾酮、S-牛膝甾酮、N-反式阿魏酰酪胺、N-顺式阿魏酰酪胺、N-反式阿魏酰-3-甲氧基酪胺、N-顺式阿魏酰-3-甲氧基酪胺、竹节参皂苷Ⅳa八种药效成分。

2.根据权利要求1所述的一种土牛膝抗炎活性提取物的制备方法，其特征在于：所述提取过程为超声或回流。

3.根据权利要求1所述的一种土牛膝抗炎活性提取物的制备方法，其特征在于：选取粗毛牛膝的根及根茎作为植物原料，将植物阴干粉碎后，通过20目筛网得到细粉，将细粉1.17kg用6倍体积甲醇回流提取2h，重复提取3次后，在60℃下减压浓缩，在阴暗低温及通风较好的地方晾干，制得醇中间提取物，提取物为黑褐色固体，130.33g，产率11.15%；将上述甲醇中间提取物130g用甲醇充分溶解，与117.5gODS-AQ全亲水性反相硅胶搅拌，水浴锅挥干溶剂，后经规格为4*10cm的ODS柱层析，利用甲醇-水溶液梯度洗脱，其中水、10%甲醇水溶液、30%甲醇水溶液、50%甲醇水溶液、70%甲醇水溶液、90%甲醇水溶液、纯甲醇、丙酮分别洗脱2.0L，各部分减压浓缩后，分别得到水洗物110.5g、10%甲醇洗脱物1.3g、30%甲醇洗脱物2.42、50%甲醇洗脱物2.99g、70%甲醇洗脱物4.37g、90%甲醇洗脱物4.31g、100%甲醇洗脱物3.39g、丙酮洗脱物1.27g,各部分测定活性，并合并30%-70%甲醇洗脱组分共得9.78g，最终收率为0.83%。