[发明专利]一种促进创面愈合的复合凝胶体系及其制备方法和应用

说明书

本发明属于皮肤创面修复技术领域，具体涉及一种促进皮肤创面愈合的复合凝胶体系、制备方法及应用，所述复合凝胶体系由凝胶材料负载肿瘤外泌体tEVs和/或亚硝基硫醇谷胱甘肽GSNO组成。本发明提供的复合凝胶体系以凝胶材料GG‑cl‑Im‑Ba为药物载体，共载NO供体亚硝基硫醇谷胱甘肽GSNO和/或肿瘤外泌体tEVs，形成的复合凝胶体系不但能够提高GSNO的稳定性，而且具有创面部位微环境响应的载体崩解和治疗药物释放特征，该复合凝胶体系通过GSNO和tEVs的协同作用，还具有促进创面愈合的作用，尤其对于高糖难治性创面的愈合。

技术领域

本发明属于凝胶材料技术领域，具体涉及一种促进创面愈合的复合凝胶体系、制备方法及应用。

背景技术

创伤是正常皮肤或组织在外界致伤因子的作用下所导致的损害，常见的创伤有手术切开、擦伤、烧伤、供皮区、褥疮、下肢血管性溃疡、糖尿病溃疡以及其他难愈合性创面等，对机体的功能产生重大的影响，和正常的伤口愈合的不同的是，难治性糖尿病足溃疡的伤口经历更长的炎症期，其中病理微环境表现为ROS的增加，ROS在过量的浓度下，阻止炎症向增殖阶段的转变，不利于成纤维细胞的增殖和迁移，从而阻碍新的健康组织的形成。

目前临床可用的促进创面愈合药物非常有限，主要是生长因子类药物及生长激素类药物。但是生长激素类药物副作用较大，有一定的局限性。而糖尿病足溃疡是一种复杂疾病，其创面的愈合还需要血管再生，成纤维细胞的增殖、迁移。NO气体对多种细菌有理想的抑制效果，特别是在对抗细菌耐药性方面显示出良好的应用前景，并且具有抑制炎症的作用，已有研究表明NO通过调控炎症及诱导血管生成在伤口愈合中具有重要作用。但是在实际应用中，直接以NO进行治疗存在局限性。因此，不仅需要开发能够产生NO的物质作为NO供体，而且迫切需要发展能够稳定供给和释放NO的递释系统。其中作为内源性NO供体的亚硝基硫醇谷胱甘肽(GSNO)半衰期短，化学性质较不稳定。为了提高GSNO在创面愈合中的稳定性，专利CN109276577A(一种一氧化氮纳米复合水凝胶及其制备方法和应用)公开了一种一氧化氮纳米复合水凝胶，以海藻酸钠为凝胶基质，NO供体GSNO为主药，使用丙烯酸树脂Eudragit RS PO作为载药材料来包封GSNO，达到对NO供体GSNO稳定保护的作用，但是，该体系在创面的自动崩解性能较差。

本发明意外的发现，以瓜尔豆胶和Im-Ba(由对二苯胺和甲酰基苯硼酸反应合成)制备的水凝胶，负载GSNO制备的复合凝胶体系GSNO/GG-cl-Im-Ba能够促进创面愈合；并且以瓜尔豆胶和Im-Ba制备的水凝胶，共同负载三阴性乳腺癌4T1肿瘤细胞来源的外泌体tEVs和GSNO制备的复合凝胶体系GSNO/tEVs/GG-cl-Im-Ba能够缩短创面愈合的时间，显著提高创面愈合率，具有长效促进难治性创面愈合的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种复合凝胶体系，所述复合凝胶体系由瓜尔豆胶、Im-Ba和亚硝基硫醇谷胱甘肽(GSNO)交联组成，所述Im-Ba结构式如下式(Ⅰ)所述：

式(Ⅰ)。

优选地，所述复合凝胶体系还包括三阴性乳腺癌4T1肿瘤细胞来源的外泌体(tEVs)。

本发明的另一目的在于提供一种复合凝胶体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)配置Im-Ba溶液：称取Im-Ba样品，配置成Im-Ba溶液，调节pH至8-9；

(2)tEVs混悬液的制备：取tEVs，并溶解于PBS缓冲溶液中，配置成tEVs混悬液；

(3)瓜尔豆胶/GSNO溶液的配置：在充入氮气的容器中，加入质量比为40:1的瓜尔豆胶粉末和GSNO，配置成瓜尔豆胶/GSNO溶液；