[发明专利]一种外泌体过滤装置

说明书

本发明公开了一种外泌体过滤装置，包括控制部分和过滤部分，所述控制部分包括微注射泵和注射器，所述过滤部分包括上压板、下压板和位于上压板和下压板之间的至少两个孔径不同的过滤膜，所述上压板上位于过滤膜的上方设有进样口，所述下压板上位于过滤膜的下方设有出样口，所述进样口和出样口位于同一直线上；所述注射器通过注射针头和注射软管与所述进样口相连，所述出样口通过出样软管连接样本收集装置，本发明所公开的过滤装置可以更加有效的筛选外泌体，并且可以详细地将外泌体按直径进行细分，可控性高，结构简单，成本低。

技术领域

本发明涉及一种外泌体过滤装置。

背景技术

外泌体是由细胞分泌的一种直径在30～150nm范围的纳米囊泡，它包含多种蛋白质和RNA，具有在细胞间传递信息的功能。此外，具有广泛的生物学特点，其表面蛋白和内载特异性物质决定外泌体的稳定性和特异性。外泌体的分子组成可以反映其来源细胞或组织的生理与病理变化。但由于外泌体尺寸上的限制，同时，细胞分泌出的物质中还包含除囊泡外的微结构物质，因此，在外泌体的分离上具有一定的困难性，如何有效、精确的分离外泌体，一直是此领域发展的重点。

传统的外泌体分离技术主要包括以下几种：第一种超高速离心法，主要通过离心力从细胞培养液中获得外泌体。此方法操作简单，但耗时、产率低，纯度上较差，而且易将细胞和囊泡破碎；第二种采用免疫亲和方法，利用外泌体表面的特异性抗体，如四跨膜蛋白等与抗原特异性结合，使得分离的外泌体纯度升高，但产率低；第三种通过构建纳米柱阵列的方式分离外泌体，利用纳米柱之间距离和角度的不同对外泌体进行筛选，该方法制备困难，而且效率较低。

目前有采用圆筒结构的外泌体过滤装置，将待过滤的样本从最顶部注入，后利用微型气泵对待过滤样本施加压力，使其逐步通过不同孔径的过滤膜后，被收集。此过滤装置是逐层过滤，最终得到所需要的直径。由于待过滤的样本中包含颗粒比较大的物质，在最开始经过第一个过滤膜(孔径较大的)时，长时间的过滤会造成过滤膜上的孔被堵塞。另外，若圆筒直径较大，气体携带样本与过滤膜边缘接触部分较少，则过滤膜悬空的部分会变大，在微型气泵推力的作用下，由于过滤膜脆性极强，因此极易破碎。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种外泌体过滤装置，以达到可以更加有效的筛选外泌体，并且可以详细地将外泌体按直径进行细分，可控性高，结构简单，成本低的目的。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种外泌体过滤装置，包括控制部分和过滤部分，所述控制部分包括微注射泵和注射器，所述过滤部分包括上压板、下压板和位于上压板和下压板之间的至少两个孔径不同的过滤膜，所述上压板上位于过滤膜的上方设有进样口，所述下压板上位于过滤膜的下方设有出样口，所述进样口和出样口位于同一直线上；所述注射器通过注射针头和注射软管与所述进样口相连，所述出样口通过出样软管连接样本收集装置。

上述方案中，所述上压板和下压板之间设置三个孔径相同的过滤膜，同时进行过滤，效率上显著提高。

上述方案中，所述过滤膜上方的上压板上设有5个进样口，所述过滤膜下方的下压板上对应的位置设有5个出样口，5个进样口分别通过分支软管连接注射软管，5个出样口通过分支软管连接出样软管和样本收集装置。

上述方案中，所述上压板和下压板为PDMS材质。

上述方案中，所述过滤膜为圆形结构，直径为1-20mm，其上分布有数个过滤孔，所述过滤孔的孔径尺寸为50-200nm。

上述方案中，所述上压板和下压板设置于模具中，可以避免漏液。

上述方案中，所述微注射泵的注入速率为0.1-0.5ul/min。