[发明专利]高效液相色谱法分离测定拉科酰胺中间体光学异构体

说明书

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱法分离拉科酰胺中间体tert‑butyl(R)‑(1‑(benzylamino)‑3‑methoxy‑1‑oxopropan‑2‑yl)carbamate及其光学异构体的方法，该方法采用以表面涂敷有多糖衍生物的硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷‑低级醇‑碱性添加剂为流动相，可以定量测定拉科酰胺中间体光学异构体的含量，指示拉科酰胺中间体光学异构体的稳定性。本发明方法专属性强，灵敏度和准确度高，操作简便。

技术领域

本发明公开了一种液相色谱分析方法，具体涉及一种分离拉科酰胺中间体及其光学异构体的分析方法。

背景技术

拉科酰胺是一种新型NMDA受体甘氨酸位点结合拮抗剂，属于新一类的功能性氨基酸，具有全新双重作用机制的抗惊厥药物。与其他的抗癫痫药物相比，拉科酰胺具有调节钠离子通道的活性，钠离子通道在调节神经系统活性、促进神经细胞之间传导具有非常重要的功能，通过降低钠离子通道的过度活跃可控制神经细胞的活性以治疗癫痫。临床上用于青少年和成人癫痫患者部分发作性癫痫（伴或不伴继发性全身性发作）的治疗。

拉科酰胺化学名为 (R)-2-acetamido-N-benzyl-3-methoxypropanamide，分子式为C₁₃H₈N₂O₃。拉科酰胺中间体化学名tert-butyl (R)-(1-(benzylamino)-3-methoxy-1-oxopropan-2-yl)carbamate，分子式为C₁₆H₂₄N₂O₄，结构式为：

该化合物的光学异构体结构式为：

对拉科酰胺中间体光学杂质进行控制，在终产品的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离测定拉科酰胺中间体及其光学异构体的高效液相色谱分析方法，从而保证拉科酰胺中间体的光学纯度，减少副反应的发生和杂质的生产，实现终产品拉科酰胺的质量控制。

本方法所述的用高效液相色谱法分离检测拉科酰胺中间体的光学纯度的方法，是采用以表面涂敷有多糖衍生物的硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇-碱性添加剂为流动相。

流动相中的低级醇选自甲醇、无水乙醇、异丙醇、丙醇、丁醇中的一种或几种，优选异丙醇，碱性添加剂为二乙胺、三乙胺、丁胺、乙醇胺中的一种。

本发明采用的手性色谱柱为CHIRALPAK AD或CHIRALPAK AD-H。

本发明流动相的配比为正己烷-低级醇的体积比为90:10~100:0，碱性添加剂的体积比为0.0%~0.5%。正己烷-低级醇的最优体积比为90:10～95:5。

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：

(1) 取拉科酰胺中间体适量，用流动相溶解样品，配制成每1mL含拉科酰胺中间体约0.1~0.2 mg的样品溶液。

(2) 设置流动相流速为0.5~1.5 mL/min，检测波长为200~250 nm，柱温：20 ℃~40℃

(3) 取(1)的样品溶液10～50 μL注入液相色谱仪，完成拉科酰胺中间体光学异构体的分离与测定。

其中：

岛津高效液相色谱仪：LC-20AB泵；SPD-20A检测器；SIL-20A自动进样器；

CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A₃脱气机

色谱柱：CHIRALPAK AD-H (250 mm*4.6 mm，5 μm)