[发明专利]基于变频激光的扫描成像系统及其方法有效
申请号: | 201910895600.1 | 申请日: | 2019-09-21 |
公开(公告)号: | CN110596062B | 公开(公告)日: | 2022-07-15 |
发明(设计)人: | 赵磊 | 申请(专利权)人: | 杭州科洛码光电科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
代理公司: | 浙江永鼎律师事务所 33233 | 代理人: | 郭小丽 |
地址: | 310012 浙江省杭州市西湖区*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 变频 激光 扫描 成像 系统 及其 方法 | ||
1.一种基于变频激光的扫描成像方法,包括如下步骤:
S1:在数字信号发生器中,设置三路模拟信号,以及一路数字脉冲信号,三路模拟信号分别为一路变频信号,两路锯齿波信号;
变频信号驱动激光器,产生变频强度激光,变频信号定义为,其中,其中表示取整数,i和k是大于0的整数,Feq和coe是大于0的有理数,是大于0的有理数;
两路锯齿波信号作为X轴和Y轴的扫描信号,驱动激光扫描装置中的两个振镜,驱动X轴和Y轴的锯齿波信号分别定义为和,其中A是大于0的有理数,表示扫描幅度,M是在x轴上横向扫描的像素点数目,N是在y轴上纵向扫描的像素点数目,i是大于0的整数,完整扫描一副二维图像的像素点数目为M×N,定义锯齿波信号的产生频率是Om Hz,Om是大于0的整数,完整扫描一副二维图像需要使用的时间是M×N/Om秒,数字脉冲信号用于驱动数字采集卡启动数据采集,实现同步探测;
S2:当上述三路模拟信号发出后,系统处于变频激光扫描,样品也随之被激发出变频强度荧光,荧光信号被共聚焦探测模块所探测,并转换为电信号被数字采集卡同步采集,数字采集卡的采样频率为Im Hz,Im为Om的P倍,Im和P均是大于0的整数,数字采集卡采集的光电信号定义为一维矩阵Dig,该矩阵的维度为M×N×P,定义pix=(yj-1)×M+xi,则 Dig[(pix-1)×P+1: pix×P]这P个元素表示第(xi,yj)个像素的荧光光强,xi为取值范围在1到M的整数,yj为取值范围在1到N的整数,对矩阵Dig进行暗区搜索,获取暗度较低的区域;
S3:对矩阵Dig的每个像素内的荧光强度数据做傅里叶变换,提取强度与相位信息,结合暗度较低区域开展差分膨胀;
S4:输出一副具有高精度空间图像,该空间图像同时包含了每一个像素点的荧光寿命信息;
在步骤S2中,所述暗区搜索,是针对数字采集卡保存的数字信号Dig,先做分段积分,得到一个新的一维矩阵Dig_2,该矩阵的维度为M×N,矩阵元素的定义方式是,其中i的取值范围是1到M×N,设置阈值Threshold,Threshold为大于0的数字,利用for循环,遍历Dig_2中的所有元素,将小于Threshold的元素对应的索引号记录到矩阵Dark中,并记录Dig_2中小于Threshold的元素数目,定义为Dark_num,Dark_num是大于0的整数,也是矩阵Dark的维度;
在步骤S3中,所述傅里叶变换,是对矩阵Dig的每个像素内的荧光强度数据做傅里叶变换,获得一个新的矩阵Dig_FFT,Dig_FFT的数据维度与Dig相同,其转换方法为Dig_FFT[(b-1)×P+1: b×P]=FFT(Dig [(b-1)×P+1: b×P]),FFT为经典的快速离散傅里叶变换;
在步骤S3中,所述强度与相位信息,是针对每一个像素内的数据提取强度信息与相位信息,对于第b个像素,将Dig_FFT[(b-1)×P+1: b×P]这P个数值中的最大值作为该像素点的强度数据,保存到二维数组Amp[xi,yj]中,其中,,对于第b个像素,相位信息从Dig [(b-1)×P+1: b×P]中提取,使用for循环,遍历Dig [(b-1)×P+1: b×P]中所有的数字,索引值是1到P,记录第一个极值点的索引值Ipeak,如果该极值是最大值,则相位,如果该极值是最小值,则相位为, ,其中;
在步骤S3中,所述差分膨胀,是在暗区搜索、傅里叶变换以及强度信息提取的基础上开展差分计算,新创建一个新的差分矩阵DiffA,该矩阵的维度为M×N,矩阵内的元素初始值均为0,提取矩阵Dark内的索引值,将每一个索引值转换为二维图像像素索引值,转换算式为,,其中i是取值范围从1到Dark_num的整数,以暗区域像素Amp[xi,yj]为参考点,DiffA[xi,yj]= Amp[xi,yj],相邻的像素点依次与该参考点进行差分,DiffA[xi+1,yj]=Amp[xi+1,yj]-DiffA[xi,yj],DiffA[xi,yj+1]= Amp [xi,yj+1]- DiffA[xi,yj],DiffA[xi-1,yj]= Amp [xi-1,yj]- DiffA[xi,yj],DiffA[xi,yj-1]= Amp [xi,yj-1]- DiffA[xi,yj],在上述差分膨胀后,DiffA将增加4个非零元素,进一步使用上述4个非零元素作为参考点,重复上述差分过程,实现差分膨胀。
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