[发明专利]一种检测肌苷酸的酶生物传感器、其制备方法和应用

权利要求书

1.检测肌苷酸的酶生物传感器，其特征在于，其线性检测范围为0.313～210μg/L，由参比电极、对电极和修饰电极组成，且所述修饰电极通过工作电极表面固化对肌苷酸敏感的物质识别膜得到；其中：

所述物质识别膜由复合溶液a、双酶复合溶液b和10mg/mL的牛血清白蛋白溶液按照体积比为1:1:1组成；

所述复合溶液a由0.5～1.25mg/mL的MXene-Ti₃C₂Tx溶液、5mg/mL的壳聚糖溶液、5mmol/L的氯金酸溶液和3mmol/L的氯铂酸溶液按体积比12：1.2：1：1组成；

所述双酶复合溶液b由2mg/mL的5’-核苷酸酶溶液和2mg/mL的黄嘌呤氧化酶溶液按体积比1：1组成；

所述MXene-Ti₃C₂Tx内T选自-OH、-O或-F。

2.如权利要求1所述的检测肌苷酸的酶生物传感器，其特征在于，

所述5’-核苷酸酶溶液由5’-核苷酸酶溶于pH 6.0、0.01M的PBS溶液得到；

所述黄嘌呤氧化酶溶液由黄嘌呤氧化酶溶于pH 6.0、0.01M的PBS溶液得到。

3.如权利要求1所述的检测肌苷酸的酶生物传感器，其特征在于，所述MXene-Ti₃C₂Tx的制备方法为：将1.6gLiF缓慢溶于20mL9mol/L的HCl水溶液，搅拌5min，然后加入1.0gTi₃AlC₂粉末，室温条件下以400rpm磁力搅拌24h；然后以3500rpm离心5min，将所得沉淀物用超纯水洗涤；重复超声及洗涤操作5～8次，当测得溶液pH为6时，收集沉淀物，溶解于100mL水中，在氩气保护下，于4℃冰浴中超声3h，使生成的Ti₃C₂T_x薄片脱层；以8000rpm离心1h，收集上清液，60℃真空干燥得到黑色粉末，即为MXene-Ti₃C₂T_x。

4.如权利要求1所述的检测肌苷酸的酶生物传感器，其特征在于，所述工作电极为玻碳电极，所述参比电极为Ag/AgCl电极，所述对电极为铂电极。

5.如权利要求1所述的检测肌苷酸的酶生物传感器，其特征在于，所述酶生物传感器的检出限为0.238μg/L。

6.权利要求1～5任一项所述酶生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对工作电极进行表面预处理；

(2)将所述复合溶液a滴加到步骤(1)表面预处理后的工作电极表面，室温晾干；

(3)将所述双酶复合溶液b滴加到步骤(2)处理后的电极表面，室温晾干；

(4)将所述牛血清白蛋白溶液滴加到步骤(3)处理后的电极表面，室温晾干，得修饰电极；

(5)将步骤(4)所得修饰电极与所述参比电极和所述对电极组成三电极体系，即得；其中：所述复合溶液a、双酶复合溶液b和牛血清白蛋白溶液的滴加量体积比为1:1:1。

7.如权利要求6所述酶生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述工作电极表面预处理的步骤为：将工作电极依次使用0.3μm和0.05μm的氧化铝粉末在抛光布上抛光成镜面，再用超纯水冲洗，然后在超纯水中超声处理1min，然后置于铁氰化钾溶液中活化处理，取出，用超纯水冲洗，氮气吹干；其中，所述铁氰化钾溶液为由K₃[Fe(CN)₆]、K₄[Fe(CN)₆]和KCl按摩尔比为1:1:100组成的混合溶液。

8.权利要求1～5任一项所述生物传感器在肌苷酸定量检测中的应用，其特征在于，所述肌苷酸的线性检测范围为0.313～210μg/L。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述肌苷酸的检出限为0.238μg/L。