[发明专利]一种利用靶向定位结合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法在审

专利信息
申请号: 201910825809.0 申请日: 2019-09-03
公开(公告)号: CN110531060A 公开(公告)日: 2019-12-03
发明(设计)人: 张英华;于鑫欣;赵钧晗;张钋;徐晓娟;殷佳艺 申请(专利权)人: 东北农业大学
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 150030 黑龙*** 国省代码: 黑龙;23
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摘要:
搜索关键词: 乳球蛋白 致敏性 修饰 靶向定位 酶水解 靶向 地衣芽孢杆菌 分子动力学 关键氨基酸 乳制品加工 蛋白酶 分子模拟 抗原表位 抗原活性 复合物 申请 优化
【权利要求书】:

1.一种利用靶向定位结合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)分子对接,使用抗体建模模块进行免疫球蛋白IgG抗体建模,实现抗体互补决定簇优化;(2)分子动力学,对复合物进行分子动力学优化;(3)能量分析,对复合物进行能量分解分析,确定β-乳球蛋白的关键抗原位点;(4)特异性酶水解,选取五种特异性蛋白酶:地衣芽孢杆菌蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、葡萄球菌蛋白酶、胰蛋白酶和嗜热菌蛋白酶分,别对β-乳球蛋白进行水解修饰,采用间接竞争酶联免疫法测定水解产物中抗原含量,根据β-乳球蛋白的抗原活性降低程度选择水解酶。

2.根据权利要求1所述的一种利用靶向定位结合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法,其特征在于,所述的优化后的IgG抗体模型的抗体互补决定簇为A26-A37、A55-A57、A95-A102、B250-B254、B270-B275、B317-B324。

3.根据权利要求1所述的一种利用靶向定位结合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法,其特征在于,所述的β-乳球蛋白的模拟抗原表位为Tyr20、Gln35、Arg40、Pro126、Glu127、Asp130、Phe151、Asn152、Pro153、Thr154、Gln155、Glu157、Hie161和Ile162。

4.根据权利要求1所述的一种利用靶向定位结合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法,其特征在于,所述的β-乳球蛋白的关键抗原位点为Phe151~Glu157。

5.根据权利要求1所述的一种利用靶向定位结合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法,其特征在于,所述的β-乳球蛋白抗原表位的关键氨基酸为Gln155,使用地衣芽孢杆菌蛋白酶对Gln155关键氨基酸进行靶向修饰,有效降低β-乳球蛋白的抗原活性,实现靶向修饰降低β-乳球蛋白致敏性这一目标。

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