[发明专利]一种方格星虫水提取物在创伤修复中的应用

权利要求书

1.一种方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述方格星虫水提取物具有修复皮肤创伤的新用途；

所述方格星虫水提取物的制备方法包括以下步骤：方格星虫虫体冲洗后打碎，按照料液比1:1-1:3加水，调节pH为6.0-8.0，置于50-65℃恒温搅拌水浴锅，提取3-6h，100℃灭菌，6000-10000RPM离心10-20min，冷冻干燥得方格星虫水提取物。

2.根据权利要求1所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

（1）建立小鼠全层皮损创伤模型；

（2）对创伤模型的小鼠进行给药；

（3）对创伤修复效果进行功效评价，所述功效评价包括一级功效评价和二级功效评价；所述一级功效评价包括止血活性评价、抗菌活性评价的的任一种或两种；所述二级功效评价为皮肤创伤愈合评价，所述皮肤创伤愈合评价包括伤口愈合率测定、掉痂时间测定、表皮生长因子测定、炎症因子测定、胶原蛋白生成分析中的任一种或几种的组合。

3.根据权利要求2所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述步骤（2）中，给药的方式为：取方格星虫水提取物100-200mg总氮含量/ml水涂抹伤口，涂满为止，每天涂抹给药一次，采用无菌生理盐水为阴性对照组，连续给药28天。

4.根据权利要求3所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述止血活性评价采用小鼠断尾法测定，通过出血量和出血时间评价体表促凝血活性。

5.根据权利要求3所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述抗菌活性评价的方法为：选用与感染相关的菌种，将活化好的菌液用无菌生理盐水稀释，在96孔板中加入50uL生理盐水为空白对照、加入50ul，20-70mg/mL样品，样品浓度以总氮含量计，，加入50ulTSB培养基和50uL稀释后的菌液，混匀，在550nm波长，记录为0h的OD值，37℃培养，分别测定8h和24h的OD值，分别计算抑菌率。

6.根据权利要求3所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述伤口愈合率测定和掉痂时间测定的方法为：所述步骤（2）中涂抹给药后，从第0天开始，每2天在同一固定高度拍照记录伤口创面情况，用软件计算伤口愈合率、记录掉痂时间；伤口愈合率测定的公式（2）为：

，

公式中n是造模后天数，单位：天。

7.根据权利要求3所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述步骤（3）中，所述步骤（3）中，所述表皮生长因子测定和炎症因子测定中涉及的因子包括TNF-a、IL-1β、TGF-β1、COL1A1 mRNA、TGF-β1、a-SMA、TGF-BRII、Smad7中的任两种或以上。

8.根据权利要求1所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述方格星虫水提取物可制成包括粉末状、溶液状、乳状、膏状、凝胶状、复合纤维膜状的任一种产品。

9.根据权利要求8所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，所述复合纤维膜状产品为通过静电纺丝技术制得的静电纺丝复合纤维膜，所述的制备方法为：

a.将方格星虫水提取物溶于超纯水中，使其完全溶解，以制得方格星虫水提取物溶液；

b.将载体材料溶于溶剂中，以制得载体材料溶液；所述载体材料包括基料和辅料，所述基料与辅料的质量比为1:1-4:1；所述基料为聚乙烯醇或聚己内酯，所述辅料为海参胶原蛋白或壳聚糖；所述溶剂为六氟异丙醇、三氟乙酸、三氟乙醇中的任一种；所述载体材料溶液的浓度为5％-10％；

c.将步骤a和步骤b所得的溶液充分涡旋混合，使其充分溶解，制得纺丝溶液；纺丝溶液中方格星虫水提取物的浓度为0.5-5.0％；

d.使用步骤c所获得纺丝溶液，采用静电纺丝的方法，制备获得生物活性敷料；静电纺丝所用溶剂为六氟异丙醇、三氟乙酸、三氟乙醇中的任一种。

10.根据权利要求9所述的方格星虫水提取物在创伤修复中的应用，其特征在于，步骤d中静电纺丝电压为15-30kV，注射器针头与接收板之间的距离可为10-15cm，注射泵的推进速度可为0.01-0.50mL/min，纺丝环境温度可为35-39℃。