[发明专利]一种十黑散的UPLC-PDA检测方法

说明书

本发明属于兽药检测技术领域，具体涉及一种十黑散的UPLC‑PDA检测方法。一种十黑散的UPLC‑PDA检测方法，其特征在于：所述十黑散是由以下重量份数的原料制备而成的：取知母30份、黄柏25份、栀子25份、地榆25份、槐花20份、蒲黄25份、侧柏叶20份、棕榈25份、杜仲25份均炒黑，与血余炭15份共粉碎，过筛，混合均匀；然后采用超高效液相色谱‑二极管阵列检测法，使用光谱图进行鉴别，使用色谱图进行含量定量检测。本发明的有益效果在于，采用本发明的方法对十黑散中的成分进行检测，通过光谱图、色谱图、保留时间、峰面积等参数能对三种主要成分栀子苷、芦丁、盐酸小檗碱进行快速定性和定量，方法精确度和重现性高。

技术领域

本发明属于兽药检测技术领域，具体涉及一种十黑散的UPLC-PDA检测方法。

背景技术

关于兽药十黑散的UPLC-PDA检测方法，内蒙古兽医1994年第1期在《中蒙兽医》上发表了《兽药十黑散质量鉴定方法的研究》，该文中是采用薄层层析的方法对十黑散进行检测的，具体的方法如下:

分别用毛细管吸取标准品液、对照品液、样品液和空白液，依次点于同一层析板上，以苯—丙酮（9:1）为展开剂，展距为13cm，取出晾干，喷以8%香草醛无水乙醇与硫酸溶液（7-10）的混合液（0.5:5）于100℃烘约5分钟，样品液与标准品液、对照品液在相应位置上显相同颜色的斑点，空白液无此斑点。测定的方法是：分别用毛细管吸取标准品液、对照液、样品液与空白液，依次点于同一层析板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5:5:1:1）为展开剂，展距15cm，喷以硫酸乙醇溶液（5-10）于100℃烘约10分钟，样品液与标准品液、对照液在相应位置上显相同颜色的斑点，空白液无此斑点。

采用该方法，鉴别结果稳定、明显、重现性好，但是其所未解决的问题:所用的试剂苯等毒性大，对人的危害大，对环境污染大，斑点容易受湿度等各种外界因素的干扰。无法对主成分进行定量测定。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种快速定性定量十黑散的UPLC-PDA检测方法。

本发明是通过下述的技术方案来实现的：

一种十黑散的UPLC-PDA检测方法，该方法中所检测的十黑散是由以下重量份数的原料制备而成的：

取知母30份、黄柏25份 、栀子25份 、地榆25份、 槐花20份、蒲黄25份 、侧柏叶20份 、棕榈25份、杜仲25份均炒黑，与血余炭15份共粉碎，过筛，混合均匀；

然后采用超高效液相色谱-二极管阵列检测法，使用光谱图进行鉴别，使用色谱图进行含量定量检测。

优选的，上述的方法中，超高效液相色谱-二极管阵列检测法，使用光谱图进行鉴别，使用色谱图进行含量定量检测的具体步骤如下：

（1）分别称取栀子苷、芦丁、盐酸小檗碱对照品，并分别用有机溶剂稀释并定容，获得栀子苷、芦丁、盐酸小檗碱的储备液；

（2）分别取上述的三种储备液，加入有机溶液定容，作为标准工作液；取不同体积的样品，进样，梯度洗脱， PDA检测器分析，通过超高效液相色谱仪进行定性定量检测；取峰面积和对照品的量制作标准曲线；

（3）采用保留时间和光谱图进行定性鉴别，进行定量测定；

（4）取样品， 加乙腈与磷酸水溶液置于离心管中，震荡，室温离心，取上清，滤膜过滤，取样品进样，测试。

优选的，（1）中，有机溶剂为甲醇。