[发明专利]迷迭香酸作为公猪精液常温抗菌保存液活性成分的应用

说明书

本发明涉及迷迭香酸作为公猪精液常温抗菌保存液中活性成分的应用。本发明迷迭香酸能够在公猪精液的常温保存过程中同时发挥抗氧化和抗菌作用，可有效改善精液质量，延长保存时间至9天，且第9天精子活率可达66.47％。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及公猪精液常温保存稀释液，具体涉及迷迭香酸作为公猪精液常温保存稀释液成分的应用。

背景技术

随着猪的人工授精技术在集约化养猪场中的推广与应用，精液的保存技术越来越受到重视，并日益显示出其在降低公猪饲养量和饲养成本、加快猪群品种改良、减少疾病传播、充分发挥良种公猪种用价值等多方面的优势。与冷冻精液相比，常温液态保存精液人工授精后具有母猪繁殖性能高(受胎率、分娩率和窝产仔数高)、所需费用低、操作程序简单等优点；从精液的保存效果考虑，常温液态保存的精液更有利于猪的繁殖，能够产生更大的经济效益。因此，目前的生产实践中猪的人工授精主要采用常温保存的精液。

猪精液常温保存是指将稀释后的精液保存在15～25℃的条件下保存的技术，又称为室温保存。常温保存主要是采用弱酸环境抑制精子活动和代谢，减少能量的消耗，再恢复pH等环境条件又使精子复苏的原理来达到保存精液的目的。在猪精液常温保存过程中会受到温度、渗透压、pH、稀释倍数、抗氧化性、缓冲剂、细菌等多种因素的影响。稀释液不仅能为精子提供代谢所需的能量，调整pH和渗透压，还可以抑制精液中微生物的繁殖，起到保护精子的作用。因此，稀释液是影响猪精液常温保存效果的关键因素。

发明内容

迷迭香酸(RA)作为广泛存在于唇形科、葫芦科、紫草科植物中的一种天然酚羟基化合物具有多种良好的药理活性，如抗氧化、抗菌、抗炎和抗肿瘤活性。

本发明基于研究发现，迷迭香酸对公猪精液抗菌保存有显著的效果。

本发明提供以迷迭香酸作为公猪精液的常温抗菌保存液中抗菌和抗氧化活性成分的应用，以迷迭香酸为活性成分经常温保存后，公猪精子活率、顶体和质膜完整率、线粒体膜电位、T-AOC水平、SOD和CAT活性、MDA含量、ATP含量、GAPDH活性、抗菌能力以及溶液渗透压指标优良。

尤其是，本发明提供迷迭香酸作为公猪精液常温抗菌保存液中唯一抗菌和抗氧化活性成分的应用，无需添加其他抗氧化剂和抗菌剂。

含有迷迭香酸的合理配方可提高公猪精液常温保存的质量。本发明同时还提供了包含迷迭香酸的公猪精液的常温保存液。

本发明的公猪精液的常温抗菌保存液由以下组分制成：每1L所述公猪精液的常温稀释液的配方为：Tris 5.65g，柠檬酸2.9g，D-葡萄糖27.5g，氯化钾0.75g，EDTA 2.35g，碳酸氢钠1.0g，柠檬酸三钠6.9g，迷迭香酸40μM，其余为超纯水。

本发明采用了迷迭香酸，能够在公猪精液的常温保存过程中有效改善精液质量，延长保存时间至9天，且第9天精子活率可达66.47％。

附图说明

图1为不同浓度迷迭香酸对公猪精液中T-AOC活性(a)和MDA含量(b)的影响；

图2为不同浓度迷迭香酸对公猪精液中SOD(a)和CAT(b)活性的影响；

图3为不同浓度迷迭香酸对公猪精子ATP含量(a)、线粒体膜电位(b)和GAPDH活性(c)的影响。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明进行进一步的详细说明。

实施例：

按照本发明的技术方案，本实施例给出七组用于公猪精液常温保存的含有迷迭香酸的稀释液配方，基础液中添加迷迭香酸的浓度分别为0μM、20μM、40μM、60μM、80μM、100μM、120μM，如表1所示进行添加。每1L稀释液中其他成分根据表2所示进行称取。