[发明专利]一种基于比率无机质谱检测的ATP分析方法有效

专利信息
申请号: 201910776396.1 申请日: 2019-08-22
公开(公告)号: CN112415080B 公开(公告)日: 2022-04-19
发明(设计)人: 刘睿;王超群;吕弋 申请(专利权)人: 四川大学
主分类号: G01N27/626 分类号: G01N27/626;G01N33/543;G01N33/553
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 610065 四川*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 比率 无机 检测 atp 分析 方法
【权利要求书】:

1.一种基于比率ICPMS检测的ATP分析方法,特征在于:将修饰有包含ATP适体分子序列的DNA1分子的磁珠与修饰有互补序列DNA2的金纳米颗粒加入反应体系中形成核心-卫星结构;当ATP存在时,适体与ATP特异性结合使AuNPs释放;通过ICPMS记录最终溶液中的197Au与 115In的信号强度并计算其比值,实现了对ATP准确和灵敏的检测;

所述的DNA1序列为:5'-NH2-T10-ATTAAAGCTCGCCATCAAATAGCTGC-3;

所述的DNA2序列为:5'-SH-T10-GCAGCTATTT-3'。

2.如权利要求1所述的ATP分析方法,其特征在于:

该分析方法包括:将修饰有包含ATP适体分子序列的DNA1分子的磁珠与修饰有互补序列DNA2的金纳米颗粒加入反应体系中形成核心-卫星结构;当存在ATP时,适体与ATP特异性结合使AuNPs释放;通过磁性分离得到上清液;上清液与王水反应后,被1.5 ng ml-1的标准In溶液稀释至4 mL;通过ICPMS记录溶液中的197Au与 115In的信号强度并计算其比值,实现了对ATP准确和灵敏的检测;

所述分析方法中形成核心-卫星结构所用的反应缓冲溶液为7μL 10 mM PBS溶液和 33μL 20 mM Tris-HCl 溶液,所述PBS溶液包含150 mM NaCl,pH=7.4,所述Tris-HCl溶液包含100 mM NaCl,pH=7.4;

所述分析方法中ATP与适体反应时间为4h;

所述分析方法中的上清液与王水反应的时间为20分钟,且所述王水的体积为50μL;

所述的分析方法对ATP的检测范围为14-2000 fmol,所述分析方法的对ATP的检出限为2 fmol。

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