[发明专利]一种基于比率无机质谱检测的ATP分析方法有效
| 申请号: | 201910776396.1 | 申请日: | 2019-08-22 |
| 公开(公告)号: | CN112415080B | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
| 发明(设计)人: | 刘睿;王超群;吕弋 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
| 主分类号: | G01N27/626 | 分类号: | G01N27/626;G01N33/543;G01N33/553 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 610065 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 比率 无机 检测 atp 分析 方法 | ||
1.一种基于比率ICPMS检测的ATP分析方法,特征在于:将修饰有包含ATP适体分子序列的DNA1分子的磁珠与修饰有互补序列DNA2的金纳米颗粒加入反应体系中形成核心-卫星结构;当ATP存在时,适体与ATP特异性结合使AuNPs释放;通过ICPMS记录最终溶液中的197Au与 115In的信号强度并计算其比值,实现了对ATP准确和灵敏的检测;
所述的DNA1序列为:5'-NH2-T10-ATTAAAGCTCGCCATCAAATAGCTGC-3;
所述的DNA2序列为:5'-SH-T10-GCAGCTATTT-3'。
2.如权利要求1所述的ATP分析方法,其特征在于:
该分析方法包括:将修饰有包含ATP适体分子序列的DNA1分子的磁珠与修饰有互补序列DNA2的金纳米颗粒加入反应体系中形成核心-卫星结构;当存在ATP时,适体与ATP特异性结合使AuNPs释放;通过磁性分离得到上清液;上清液与王水反应后,被1.5 ng ml-1的标准In溶液稀释至4 mL;通过ICPMS记录溶液中的197Au与 115In的信号强度并计算其比值,实现了对ATP准确和灵敏的检测;
所述分析方法中形成核心-卫星结构所用的反应缓冲溶液为7μL 10 mM PBS溶液和 33μL 20 mM Tris-HCl 溶液,所述PBS溶液包含150 mM NaCl,pH=7.4,所述Tris-HCl溶液包含100 mM NaCl,pH=7.4;
所述分析方法中ATP与适体反应时间为4h;
所述分析方法中的上清液与王水反应的时间为20分钟,且所述王水的体积为50μL;
所述的分析方法对ATP的检测范围为14-2000 fmol,所述分析方法的对ATP的检出限为2 fmol。
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