[发明专利]一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法

说明书

本发明提供了一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，所述方法包括：提供一液相色谱串联质谱测试平台，采用多反应检测模式调整质谱参数；通过所述液相色谱串联质谱测试平台检测所述生物基质，测定所述生物基质中的靶标代谢物含量，其中，所述生物基质通过一提取体系进行预处理，所述提取体系包括有机溶剂。根据本发明提供的检测方法，能够快速、准确、特异、灵敏地定量生物基质中的多种靶标代谢物的含量，为肝胆疾病非侵入式临床诊断标志物的筛选以及发病机制的研究奠定了基础。

技术领域

本发明涉及生物分析与检测技术领域，具体地说，涉及一种生物基质中靶标代谢物含量检测的方法。

背景技术：

肝脏是体内生物转化作用的重要器官之一，综合研究表明，肝脏代谢紊乱与肝病发病率及疾病进程发展息息相关，尤其是脂质代谢稳态破坏(包括磷脂类、胆固醇类物质)会导致肝细胞线粒体功能紊乱及脂质堆积，而肝脏中脂质和胆汁酸的过度积累可能为诱发肝细胞癌的主要原因。随着肝脏细胞不可逆的危害加重，胆汁酸、磷脂类、固醇类和类二十烷酸代谢特征均会产生不同程度的变化，因此，定量分析检测这些重要代谢物对于跟踪肝病的进展、肝癌的早期防治以及肝病的发病机制均具有重要意义。

然而目前，由于对这些代谢物的理化性质差异大，且在生物体内丰度跨越几个数量级，因此想要在一个平台上实现对胆汁酸、磷脂类、固醇类和类二十烷酸类代谢物的高通量分析方法难度非常大，因此，设计一种生物基质中靶标代谢物含量的检测方法十分重要。

发明内容：

本发明的目的之一提供一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，用于解决现有技术过程中在一个平台上实现对生物基质中靶标代谢物的高通量分析方法难以实现的问题，所述方法操作简便、运行时间短，测定效果理想。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明是通过包括以下技术方案实现的：

一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，其特征在于，所述方法包括：提供一液相色谱串联质谱测试平台，采用多反应检测模式调整质谱参数；通过所述液相色谱串联质谱测试平台检测所述生物基质，测定所述生物基质中的靶标代谢物含量，其中，所述生物基质通过一提取体系进行预处理，所述提取体系包括有机溶剂。

在本发明的一实施方式中，所述质谱参数选自母子离子的质荷比、保留时间、去簇电压，及碰撞电压中的至少一项。

在本发明的一实施方式中，所述液相色谱柱选自C8或C18色谱柱。

在本发明的一实施方式中，所述提取体系中所述有机溶剂选自甲醇、乙腈、二氯甲烷、异丙醇及上述任意两者的混合溶剂。

在本发明的一实施方式中，所述生物基质选自体液，所述有机溶剂与所述体液的体积比为(1～20):1。

在本发明的一实施方式中，所述有机溶剂为体积比选自(30-70):(70-30)的甲醇与二氯甲烷组合。

在本发明的一实施方式中，所述生物基质选自组织，所述有机溶剂-组织的质量比为(2～20):1。

在本发明的一实施方式中，所述提取体系中还包括抗氧化剂。

在本发明的一实施方式中，所述生物基质中靶标代谢物选自类二十烷酸、磷脂类、胆固醇类、胆汁酸类中任意一种或上述其任意组合。

在本发明的一实施方式中，所述检测方法还选用了内标物质，所述内标物质质谱参数选自内标母子离子的质荷比、保留时间、去簇电压，及碰撞电压中的至少一项。