[发明专利]靶向长链非编码RNA DDX11-AS1的ASO、试剂盒及在肝癌治疗中的应用

说明书

本发明公开了一种靶向长链非编码RNA DDX11‑AS1的ASO、试剂盒及在肝癌治疗中的应用。通过设计并合成靶向DDX11‑AS1的ASO，将其转染至肝癌细胞系中，检测肝癌细胞的增殖、细胞生长周期、迁移以及侵袭能力，证实该ASO能够通过抑制DDX11‑AS1的表达来显著地影响肝癌的发生及发展。本发明为肝癌的治疗提供了新的药物研发方向以及靶点。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及靶向长链非编码RNA DDX11-AS1的ASO、试剂盒及在肝癌治疗中的应用。

背景技术

长链非编码RNA(lncRNA)是长度大于200bp的非编码RNA，主要由RNA聚合酶II转录，缺乏明显的开放阅读框。lncRNAs可能在表观、转录和转录后水平上参与调控基因的表达。lncRNAs调节病理生理过程通过基因印迹、组蛋白修饰、染色质重塑、转录激活、转录干扰、核转运和细胞周期调控等机制。最近提出的竞争性内源性RNA(ceRNA)调控网络也表明，lncRNAs可能作为海绵体竞争性地与microRNAs(miRNAs)结合，从而抑制其功能(即阻断与目标mRNAs的相互作用)。多种lncRNAs在不同的疾病类型中异常表达，尤其是在发病机制不明确的难治性肿瘤中。lncRNA调节异常通常通过促进肿瘤细胞中的恶性生物学行为(例如增殖，侵袭和转移)而促进肿瘤的进展。另外，lncRNAs具有较高的组织特异性、高效率和高稳定性，有望成为诊断和预后的潜在治疗靶点和生物标志物。

肝癌(Hepatocellular Carcinoma，HCC)在全世界癌症发病率和死亡率中分别位居第六和第三，而且发病率呈逐年上升的趋势。中国是肝癌的高发区，每年死于肝癌的人数约占全世界肝癌死亡人数的一半。由于我国肝癌多有乙肝感染背景且常合并肝硬化、肝功能不全以及早期播散和转移，因此手术的切除率低，复发率高，能获得手术切除机会的患者仅占20％-30％。虽然在肝癌中已经发现了一些基因组和表观遗传学的改变，主要集中在细胞凋亡、自噬和肝炎病毒，但肝癌的分子机制仍不清楚，且治疗手段极其有限。近年来，有研究表明lncRNAs与肝癌的发生发展密切相关，主要包括肿瘤细胞过度增殖、抑癌基因失活、肿瘤细胞永生化、肿瘤转移、浸润和凋亡抑制等。

肿瘤分子的靶向治疗作为一种新型肿瘤疗法，正在逐渐成为临床肿瘤治疗的重要手段。分子靶向治疗的原理是通过抑制或干扰特异性分子(肿瘤驱动基因或信号传导通路关键基因)的表达，从而抑制肿瘤细胞的生长、转移或者诱导其凋亡，到达治疗肿瘤的目的。与传统的治疗手段相比，具有更好的准确性，能选择性的杀死肿瘤细胞，对正常组织或细胞的损伤较低或无损伤，副作用小，不易产生耐药性。但目前市场上靶向分子治疗的药物非常有限，其主要原因还是在于已知的特异靶点较奇缺，迫切需要寻找到新的有效的药物靶点。

检测肝癌lncRNA DDX11-AS1的表达水平可以为肝癌的临床诊断提供参考。在未来临床治疗中，lncRNA不仅可以成为新的肝癌早期诊断和发展进程相关的标记物，而且也有望通过改变lncRNA或其靶基因的表达来治疗肝癌等疾病。寻找和鉴定与肝癌发生相关的lncRNA及其靶基因，为肝癌的临床治疗提供证据。

发明内容

本发明的目的在于提供靶向长链非编码RNA DDX11-AS1的ASO在肝癌治疗中的应用和检测试剂盒。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明的第一目的是提供一种ASO，其特征在于：该ASO能够抑制长链非编码RNADDX11-AS1的表达。

进一步的，该ASO能够使肝癌细胞中长链非编码RNA DDX11-AS1的表达水平下调60％以上。

进一步的，所述长链非编码RNA上的ASO作用靶点在1-3个。

进一步的，所述的ASO选自SEQ ID NO.1-3中的一种或多种。